環境発がん物質暴露の高感度モニタリング法の確立とその応用

环境致癌物暴露高灵敏监测方法的建立及其应用

• 批准号: 10770155
• 负责人: 市場 正良
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770155/
• 关键词: DNA付加体; HPLC; 白血球

人は日常生活において環境から様々な変異原物質の暴露を受けている。それらの変異原物質は体内で代謝されDNAと結合しDNA付加体を形成する。DNA付加体を測定することは環境変異原物質の暴露指標として有用であり,従来^<32>P-ポストラベル法により測定されてきた。しかし,^<32>P-ポストラベル法は操作が煩雑であり,再現性にも問題があることが知られている。また,薄層クロマトグラフィーの分離能のため多環芳香族等大きな分子による付加体は測定できるが,メチル化等低分子の付加体は同時に測定できない問題もある。そこで,これらの問題点を解決するため1)薄層クロマトグラフィー法の改良,2)薄層クロマトグラフィーに代わり高速液体クロマトグラフィー(HPLC)を使用するDNA付加体測定法を検討を行った。薄層クロマトグラフィー法の改良はバックグランドを洗浄するステップを迫加することにより行った。HPLC法は,検出器としてフローセルラジオアイソトープ検出器を使用した。検出器のセルはを改良して高感度化を検討中である。

在日常生活中，人们暴露于环境中的各种诱变物质。这些诱变剂在体内代谢，并与DNA结合以形成DNA加合物。测量DNA加合物可作为暴露环境诱变剂的指标，并且先前已通过P板标签方法测量。但是，众所周知， ^<32> p postlabeling方法的操作很复杂，并且存在可重复性的问题。此外，由于薄层色谱的分离能力，可以测量由大分子（例如多环芳烃）制成的加合物，但是不能同时测量由小分子（例如甲基化）制成的加合物。因此，为了解决这些问题，我们研究了薄层色谱法改进，以及2）使用高性能液相色谱法（HPLC）而不是薄层色谱法的DNA加合物测定法。通过施加背景洗涤步骤来改善薄层色谱过程。 HPLC方法使用流细胞放射性同位素检测器作为检测器。正在研究检测器细胞以提高其敏感性。

项目成果

Kiyohara C: "Relationship between aromatic-DNA adduct levels and inducibility of the drug metabolising enzyme aryl hydrocarbon hydroxylase in lymphocytes"Medical Science Research. 27. 651-655 (1999)

Kiyohara C：“芳香族DNA加合物水平与淋巴细胞中药物代谢酶芳基烃羟化酶的诱导能力之间的关系”医学科学研究。

Ichiba M et al: "Effect of genetic polymorphism for metabolic enzymes on the relationship between smoking dose and DNA adducts in lymphocytes." Biomarkers. 3. 425-32 (1998)

Ichiba M 等人：“代谢酶的遗传多态性对吸烟剂量与淋巴细胞 DNA 加合物之间关系的影响。”

Ichiba M et al.: "Lymphocytes DNA adducts and genetic polymorphism for metabolic enzymes in low dose cigarette smokers." Biomarkers. 3. 63-71 (1998)

Ichiba M 等人：“低剂量吸烟者的淋巴细胞 DNA 加合物和代谢酶的遗传多态性。”

Zhang J: "Aromatic DNA adducts in coke oven workers in relation to exposure,lifestyle and genetic polymerphism of metabolic enzymes"International Archives of Occupational and Environmental Health. 73. 127-135 (2000)

张杰：“焦炉工人芳香族DNA加合物与暴露、生活方式和代谢酶基因聚合的关系”，国际职业与环境健康档案。

Pan G et al.: "A study of multiple biomarkers in coke oven workers - a cross-sectional study in China." Carcinogenesis. 19. 1963-8 (1998)

Pan G 等人：“焦炉工人多种生物标志物的研究——一项在中国进行的横断面研究。”