治療耐性を獲得した泌尿器癌に対するイミプラミンブルーを用いた制癌作用の検討

丙咪嗪蓝对耐药性泌尿系肿瘤的抗癌作用研究

• 批准号: 22K16818
• 负责人: 梁 英敏
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16818/
• 关键词: イミプラミンブルー; アポト－シス; 上皮間葉移行; 分子標的薬; 前立腺癌; 膀胱癌; 腎細胞癌

筋層浸潤性膀胱がんに対する現在の治療法は侵襲性が高く、より効果的で侵襲性の低い分子標的療法の開発が期待されています。 非筋浸潤性および浸潤性膀胱がん細胞株を使用して、膀胱がんに対するイミプラミンブルー(IB)を使用した新しい分子標的療法を研究しました。強力な NADPH オキシダーゼ阻害剤である IB を使用して、その抗腫瘍効果を評価しました。 ヒト膀胱癌細胞株 KK-47 (非浸潤細胞)、T24 および 5637 (浸潤細胞) を実験に使用しました。 細胞増殖アッセイ、アポトーシスアッセイ、創傷治癒アッセイおよびウェスタンブロッティングを実施しました。 さらに、KK-47、T24、および5637を有するマウスにDIBを腫瘍内投与し、腫瘍の大きさおよび重量を経時的に観察しました。 腫瘍を摘出し、免疫免疫組織化学 (IHC) 染色を実施しました。 細胞増殖はすべての細胞株で大幅に抑制され、KK-47 ではアポトーシス細胞が増加しました。IB による 47 および T24。 創傷治癒は、DIB によりすべての細胞株で抑制されました。 IB は、KK-47 および T24 におけるカスパーゼ 3 および切断型カスパーゼ 3 のタンパク質発現を増加させました。 T24 および 5637 では、IB は E-カドヘリンのタンパク質発現を増加させました。 IB はすべての細胞株で腫瘍増殖を安全に抑制しました。KK-47とT24ではDIBにより切断型カスパーゼ-3とE-カドヘリンの発現が増加し、カスパーゼ-3 経路を介してアポトーシスを誘導することで腫瘍の増殖を阻害し、膀胱がんにおける EMT を抑制することで遊走と浸潤を抑制しました。上記結果について論文作成し現在投稿中です。

目前肌肉浸润性膀胱癌的治疗方法具有高度侵袭性，因此有望开发出更有效、侵袭性更小的分子靶向疗法。 我们使用非肌肉侵袭性和侵袭性膀胱癌细胞系来研究一种使用丙咪嗪蓝 (IB) 治疗膀胱癌的新型分子靶向疗法。 IB 是一种有效的 NADPH 氧化酶抑制剂，用于评估其抗肿瘤功效。 实验中使用人膀胱癌细胞系KK-47（非侵袭性细胞）、T24和5637（侵袭性细胞）。 进行细胞增殖测定、凋亡测定、伤口愈合测定和蛋白质印迹。 此外，我们对携带 KK-47、T24 和 5637 的小鼠进行瘤内注射 DIB，并观察随时间变化的肿瘤大小和重量。 切除肿瘤并进行免疫组织化学（IHC）染色。 所有细胞系中的细胞增殖均显着受到抑制，KK-47 中的凋亡细胞有所增加。 IB 的 47 和 T24。 在所有细胞系中，DIB 都会抑制伤口愈合。 IB 增加 KK-47 和 T24 中 caspase-3 和裂解 caspase-3 的蛋白表达。在 T24 和 5637，IB 增加了 E-钙粘蛋白的蛋白表达。 IB 安全地抑制所有细胞系中的肿瘤生长。在 KK-47 和 T24 中，DIB 增加裂解的 caspase-3 和 E-钙粘蛋白的表达，通过 caspase-3 途径诱导细胞凋亡来抑制肿瘤生长，并抑制膀胱癌的 EMT，从而抑制迁移和侵袭。我已经根据上述结果写了一篇论文，目前正在提交。