Profiling the Molecular Characteristics and Transitions Through Upper Tract Tumor Origin, Bladder Recurrence, and Muscle Invasive Bladder Progression in Upper Tract Urothelial Carcinoma

分析上尿路尿路上皮癌上尿路肿瘤起源、膀胱复发和肌层浸润性膀胱进展的分子特征和转变

• 批准号: 22K16809
• 负责人: 茂田 啓介
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16809/
• 关键词: 尿路上皮癌分子サブタイプ; FGFR3; p53; CK5/6; CK20; 尿路上皮癌; 分子サブタイプ; 進展系統樹

①ヒト腎盂尿管癌手術後臨床検体のマイクロアレイ(Tissue Micro Array)の作成当教室で2000年から2018　年までに腎盂尿管癌に対して腎尿管全摘除術を受けた214例の上部尿路上皮癌検体(腎盂癌116例、尿管癌98例)を用いた臨床組織から病理学的に腫瘍中心部(Center of tumor: CT)・腫瘍辺縁部(Invasive margin: IM)を抽出し、腫瘍内不均一性を克服する組織マイクロアレイ(Tissue Microarray)を作成した。　また尿路上皮癌分子サブタイプに代表される4種の分子マーカー（CK5/6 CK20　FGFR3 p53）を免疫組織化学染色を行い、解析装置(Histo Quest)で自動化されたシングルセルカウントを実施した。結果、UTUC原発においてはpT stageによって、FGFR3陽性組織からp53陽性組織に移行する現象を確認した。また、術後膀胱内再発検体は主にCK20陽性群に多く、CK5/6陽性群に少ないことを確認した。②腎盂尿管癌、再発後膀胱癌、筋層進展後臨床検体の凍結保存とNGS解析用サンプルの作成当院では倫理承認申請(20180354)後各患者に同意を取ったうえで、腎盂尿管摘出時の癌検体の一部、そして膀胱内再発後のTUR検体一部をDeep Freezerで凍結保存および特殊溶液でのFFPE検体保存を実施し一部DNA解析を開始した。腎盂尿管癌検体の経時的な膀胱内再発/進展メカニズムの解明の一助にしたいと考える。

① 人肾盂输尿管癌术后临床标本微阵列（组织微阵列）的制作 我科2000年至2018年接受肾盂输尿管癌全肾输尿管切除术的214例患者的上尿 肿瘤中心：临床组织病理学确定使用上皮癌标本（肾盂癌116例，输尿管癌98例）。提取 CT）和肿瘤边缘（IM）以创建克服肿瘤内异质性的组织微阵列。此外，对代表尿路上皮癌分子亚型的四种分子标记物（CK5/6 CK20 FGFR3 p53）进行免疫组织化学染色，并使用分析仪（Histo Quest）进行自动单细胞计数。结果，我们证实了UTUC主发电厂由于pT阶段而从FGFR3阳性组织转变为p53阳性组织的现象。此外，我们证实术后膀胱内复发标本主要见于CK20阳性组，CK5/6阳性组很少。 ②肾盂输尿管癌、膀胱癌复发后的临床标本的冷冻保存，以及肌层延伸和NGS分析样本的制备在我院，在申请伦理批准（20180354）并获得每位患者的同意后，部分癌症将切除时的标本和膀胱内复发后的部分TUR标本冷冻保存，将FFPE标本保存在特殊溶液中，并对其中一些标本进行DNA分析。我们希望帮助阐明肾盂癌和输尿管癌标本随时间推移膀胱复发/进展的机制。