Peripheral Mechanisms of Opioid-Induced Hyperalgesia

阿片类药物引起的痛觉过敏的外周机制

基本信息

批准号：
22K16593
负责人：
山北俊介
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16593/
关键词：
ERK p38MAPK オピオイドオピオイド誘発性痛覚過敏サイトカイン

项目摘要

雄性SDラットを実験に用い、モルヒネ痛覚過敏モデルとして、全身麻酔下にモルヒネ20mg/kg/dayを3日間腹腔内投与し、行動解析により痛覚過敏を観察し、モルヒネ痛覚過敏モデルを確立した。痛覚過敏が観察できた後、ラットDRGにおいてERKおよびp38MAPK活性化を観察した。ERKおよびp38MAPKの一次知覚神経における発現解析のため、第5腰髄神経のDRGを採取し、組織切片を作成、免疫組織化学法によりリン酸化ERKおよびp38MAPK陽性細胞を可視化した。ニューロン、グリア細胞の選択的マーカーとの二重染色により両者の細胞分布を同定し、ウェスタンブロッティングによりリン酸化ERKおよびp38MAPKの発現量を定量した。オピオイド受容体拮抗薬としてナロキソンを投与し、ERKおよびp38MAPK活性化に及ぼす影響を評価した。モルヒネ痛覚過敏モデルにおいて、有意にリン酸化ERKおよびp38MAPKの発現が増加し、ナロキソン投与によりこれらは抑制された。リン酸化ERKはニューロンとグリア細胞、p38MAPKはニューロンに発現することを確認した。ERKおよびp38MAPK阻害剤、コネキシン・パネキシン阻害剤が痛覚閾値に与える影響を調査した。モルヒネ痛覚過敏モデルを作成するにあたり、モルヒネ投与前に以下の薬剤を投与し、痛覚閾値を測定した（ERKリン酸化を阻害する薬剤としてMEK阻害剤であるU0126、p38MAPK阻害剤としてFR167653、コネキシン・パネキシン阻害剤としてカルベノキソロン）。モルヒネ投与数日後には、機械刺激に対する逃避閾値の低下と、熱刺激に対する逃避潜時の短縮が認められ、投与薬剤の有効性が示唆された。

在实验中使用了雄性SD大鼠，并在全身麻醉下以20 mg/kg/day吗啡进行腹膜内腹膜内治疗3天，并通过行为分析观察到痛觉过敏，并建立了吗啡痛量模型。观察到痛觉过敏后，在大鼠DRG中观察到ERK和p38mapk激活。为了在ERK和p38mapk的一级感觉神经中进行表达分析，收集了第五腰神经的DRG，制备组织切片，并通过免疫组织化学可视化磷酸化的ERK和p38mapk阳性细胞。通过用神经元和神经胶质细胞的选择性标记来鉴定两个细胞的细胞分布，并通过Western blotting量化了磷酸化ERK和P38MAPK的表达水平。纳洛酮作为阿片受体拮抗剂施用，并评估其对ERK和p38mapk激活的影响。在吗啡痛觉过敏模型中，磷酸化的ERK和p38mapk的表达显着增加，这些表达被纳洛酮施用抑制。我们证实，磷酸化的ERK在神经元和神经胶质细胞中表达，p38mapk在神经元中表达。研究了ERK和p38MAPK抑制剂和连接蛋白脑性抑制剂对疼痛感觉阈值的影响。 To create a morphine hyperalgesia model, the following drugs were administered before morphine administration, and the pain threshold was measured (UT0126, a MEK inhibitor as an agent that inhibits ERK phosphorylation, FR167653, a p38MAPK inhibitor, and carbenoxolone as a connexin-panexin inhibitor).吗啡给药后的几天，观察到机械刺激的疏散阈值和热刺激的疏散延迟，这表明施用药物的功效。