免疫チェックポイント分子を用いた肺移植拒絶反応における新規免疫寛容の誘導

使用免疫检查点分子诱导肺移植排斥中的新型免疫耐受

基本信息

批准号：
22K16564
负责人：
海寳大輔
金额：
$ 3万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

マウス同所性肺移植モデルについては、慢性拒絶反応（CLAD）モデルの作成を進めている。C57BL/6からC57BL/6へと左肺を移植するisograftを作成しコントロールとして、CLADモデルとしてドナーC57BL/10(MHC H2b)からマイナー抗原不一致のレシピエントC57BL/6(MHC H2b)に移植するモデルを用いて行っているが、CLADモデルのCLAD発症率が安定しないため、他のCLADモデルでの研究も検討している。肺の病理組織検査（H-E染色）、免疫染色(trichrome染色、PD-L1染色)の他に、肺、リンパ節より抽出したmRNAに対する、PD-1発現解析や、各臓器やserumでのサイトカイン及びサイトカイン産生細胞の解析について今後進めていく予定である。レトロウイルスベクターを用いてCIITA遺伝子を遺伝子導入することによりMHC classIIを発現させる手法を利用して、抗原提示能を有するマウス免疫細胞を作製し、PD-L1を含む免疫チェックポイント分子を同時に強発現させることにより、拒絶反応（抗原抗体反応）を抑えられるかどうかの検討を進めている。レトロウイルスベクターを用いることにより、MHC classIIおよび免疫チェックポイント分子を同時に強発現することは可能であった。現在、in vitroでの抗原提示反応への影響について検討中である。その後、CLADモデルを用いて、移植前7日前にレシピエントの尾静脈よりマウス免疫細胞を投与してドナー特異的免疫寛容状態作成後に肺移植を行い、in vivoでの拒絶反応への影響についても検討していく。

关于小鼠原位肺移植模型，我们目前正在开发慢性排斥反应（CLAD）模型。创建同种移植物，将左肺从 C57BL/6 移植到作为对照的 C57BL/6，CLAD 模型是将供体 C57BL/10 (MHC H2b) 移植到受体 C57BL/6 (MHC H2b) 的模型然而，由于CLAD模型的CLAD发病率不稳定，我们也在考虑使用其他CLAD模型进行研究。除了肺部的组织病理学检查（H-E染色）和免疫染色（三色染色、PD-L1染色）外，我们还对从肺部和淋巴结提取的mRNA进行PD-1表达分析，以及各器官和细胞因子和血清分析。我们计划将来继续分析产生细胞因子的细胞。利用逆转录病毒载体导入CIITA基因来表达MHC II类的方法，我们创建了具有抗原呈递能力的小鼠免疫细胞，同时强烈表达了包括PD-L1在内的免疫检查点分子，目前我们正在研究是否会出现排斥反应。这样做可以抑制（抗原抗体反应）。通过使用逆转录病毒载体，可以同时强烈表达MHC II类和免疫检查点分子。我们目前正在研究其对体外抗原呈递反应的影响。然后，使用CLAD模型，在移植前7天通过受体的尾静脉注射小鼠免疫细胞，以创建供体特异性免疫耐受状态，随后进行肺移植，并研究对体内排斥反应的影响。它。