網羅的遺伝子発現解析を用いた過敏性腸症候群(IBS)の病態解明

利用综合基因表达分析阐明肠易激综合征 (IBS) 的病理学

• 批准号: 22K15986
• 负责人: 屋嘉比 聖一
• 金额: $ 3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15986/
• 关键词: 過敏性腸症候群（IBS）; 下痢; 副腎皮質刺激放出因子(CRF); 網羅的遺伝子発現解析; 嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子(CFTR); 過敏性腸症候群

過敏性腸症候群（IBS）における下痢発症の機序についてラットを用いて検証した。既に報告のあるように、ラットにストレスをかける代わりに副腎皮質刺激放出因子(CRF)を腹腔内投与（IP）し、下痢を誘発することとした。初めに、ラットに下痢を起こす至適容量を確認する目的で複数の容量でCRFを投与し、排便数および下痢発症について確認し、既報と同様にCRF(10μg/kg)を良好な下痢の出現を認めた。また、既報と同様にCRF投与後の排便時間についても検証し、既報同様６０分で良好な結果が得られた。次に、CRF投与群とコントロール群各々から４匹づつ回腸末端を摘出し、網羅的遺伝子発現解析を行った。これらの結果として、水分泌に関与する項目について有意な差を認めており、詳細については現在解析中である。また、これら水分泌に関与するチャンネルの一つとして嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子(CFTR)に着目しており、CFTR-inhなどを用いて排便や下痢の発症を抑制できるか検証している。しかしながら、これらinhibitorをラットに用いた既報はあまりなく、投与のタイミングや容量などについて検証する必要があり、既報を参考に投与時間や投与容量を検証しているが、試薬の溶解のしづらさなどもあり溶解方法などについても濃度なども含め検証している。また、今回使用している試薬はDMSOで溶解したため、DMSO自体のラットへの影響を検証する必要があり、実際に種々の濃度や容量での検証を行い、ラットへの影響がないことを確認し、実際のCFTR-inh投与を行なった。これらの結果より一定の結果は現在得ているが、詳細については今後追加実験を行い症例数を増やして検討していく予定である。

使用大鼠研究了肠易激综合征（IBS）腹泻发作的机制。正如之前报道的，我们不是给大鼠施加压力，而是腹膜内（IP）施用促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）来诱导腹泻。首先，为了确定引起大鼠腹泻的最佳剂量，对大鼠进行多剂量施用CRF，并确认排便次数和腹泻的发生，如先前报道的，对大鼠施用CRF（10μg/kg）。以诱发良好的腹泻入院。另外，与之前的报道类似，我们也验证了CRF给药后的排便时间，与之前的报道一样，在60分钟时获得了良好的结果。接下来，去除CRF施用组和对照组各4只动物的末端回肠，并进行全面的基因表达分析。结果，我们发现与水分分泌相关的项目存在显着差异，目前正在分析细节。我们还关注囊性纤维化跨膜电导调节剂（CFTR）作为参与水分泌的通道之一，并正在验证 CFTR-inh 是否可以用于抑制排便和腹泻的发生。但这些抑制剂在大鼠中使用的报道并不多，需要验证给药时机和用量，虽然参考以往的报道对给药时间和用量进行了验证，但很难溶解。我们也在验证溶解方法和浓度等。另外，由于这次使用的试剂是溶解在DMSO中的，所以需要验证DMSO本身对大鼠的影响，我们实际在不同的浓度和体积下进行了验证，确认对大鼠没有影响。进行CFTR-inh施用。虽然我们从这些结果中获得了一定的结果，但我们计划在未来进行额外的实验并增加案例数量来检查细节。