肝癌の治療効果予測におけるハイスループット・リキッドバイオプシーシステムの構築

预测肝癌治疗效果的高通量液体活检系统的构建

• 批准号: 22K15600
• 负责人: 村岡 優
• 金额: $ 3万
• 依托单位: University of Yamanashi
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15600/
• 关键词: リキッドバイオプシー; cell free DNA; 肝細胞癌

肝細胞癌診療におけるリキッドバイオプシーにおいて、簡便に高精度な検査が望ましい。本施設では腫瘍由来のcell free DNA (cfDNA)をデジタルPCR (dPCR)で解析する手法を確立した。早期肝細胞癌から古典的肝細胞癌まで高頻度にみられるTERT promoter C228T変異をdPCRで検出し、定量的評価に応用した。本施設のこれまでの報告より、TERT promoter変異陽性cfDNA (以下mutant cfDNA)量は腫瘍量を反映し、特に治療後のmutant cfDNAの変化は短期間の腫瘍壊死量を反映していた。アテゾリズマブ・ベバシズマブ併用療法後のmutant cfDNA量を解析したところ、治療後短期間のmutant cfDNA増加量は乏しく、既報にあるチロシンキナーゼ阻害剤 (TKI)治療後のmutant cfDNA量の増加と異なる動態を確認した。また、アテゾリズマブ・ベバシズマブ併用療法著効例では2コース目開始時点のmutant cfDNAが消失している症例がみられた。肝細胞癌治療後のmutant cfDNA量の動態は使用する薬剤による相違があると考えられ、治療効果の早期予測へ応用するために臨床検体を用いた検討を継続する必要がある。肝細胞癌の薬物治療は2022年12月にデュルバルマブ・トレメリムマブ併用療法が認可されたことで、今後免疫チェックポイント阻害剤の使用頻度が増えると考えられる。また、CTNNB1変異の有無と免疫チェックポイント阻害剤の治療効果について注目されている。既存のデータベースより、肝細胞癌にみられるCTNNB1変異はchr3: 41224606-41224646 (GRCh38)の約40bpの領域に集中していることが分かり、複数の変異を同時に検出するmultiplex digital PCRの検査系の開発に着手した。

液体活检治疗肝细胞癌需要一种简单且高度准确的测试。在该设施中，我们建立了一种使用数字 PCR (dPCR) 分析肿瘤来源的无细胞 DNA (cfDNA) 的方法。通过dPCR检测早期肝细胞癌至经典肝细胞癌中常见的TERT启动子C228T突变并应用于定量评估。我单位前期报告显示，TERT启动子突变阳性cfDNA（以下简称“突变cfDNA”）的数量反映了肿瘤的数量，特别是治疗后突变cfDNA的变化反映了肿瘤坏死的数量。很短的一段时间。当我们分析atezolizumab和贝伐珠单抗联合治疗后突变cfDNA的量时，我们发现在治疗后的短时间内突变cfDNA的量几乎没有增加，并且我们确认突变cfDNA量的增加与治疗后的不同。先前报道用酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗后突变 cfDNA 的数量确实增加了。此外，在对atezolizumab/贝伐珠单抗联合治疗反应良好的患者中，存在突变cfDNA在第二个疗程开始时消失的病例。据认为，肝细胞癌治疗后突变cfDNA量的动态因所使用的药物而异，因此有必要继续使用临床标本进行研究，以便将其应用于治疗效果的早期预测。随着durvalumab和tremelimumab联合疗法于2022年12月获批用于肝细胞癌的药物治疗，相信未来免疫检查点抑制剂的使用将会更加频繁。此外，CTNNB1突变的存在与否以及免疫检查点抑制剂的治疗效果也受到关注。基于现有数据库发现，肝细胞癌中发现的CTNNB1突变集中在chr3：41224606-41224646（GRCh38）约40bp的区域，需要开发同时检测多个突变的多重数字PCR检测系统。已经开始了。

项目成果

進行肝細胞癌薬物療法におけるcell free DNA量を用いたリキッドバイオプシーの臨床応用

游离DNA量液体活检在晚期肝癌药物治疗中的临床应用

• 发表时间: 2022
• 作者: 村岡優; 前川伸哉; 榎本信幸
• 通讯作者: 榎本信幸

Clinical Indications for Liquid Biopsy using Cell Free DNA Content in the Pharmacotherapy of Advanced Hepatocellular Carcinoma

使用游离 DNA 含量进行液体活检在晚期肝细胞癌药物治疗中的临床适应症

• 发表时间: 2022
• 作者: Nishikawa Gen;Kawada Kenji;Hanada Keita;Maekawa Hisatsugu;Itatani Yoshiro;Miyoshi Hiroyuki;Taketo Makoto Mark;Obama Kazutaka;村岡 優;Masaru Muraoka
• 通讯作者: Masaru Muraoka