ゴールデンハムスターを用いた転移性脳腫瘍モデルによる腫瘍溶解性ウイルス治療法開発

利用金仓鼠转移性脑肿瘤模型开发溶瘤病毒疗法

• 批准号: 22K15611
• 负责人: 清水 勇三郎
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K15611/
• 关键词: 腫瘍溶解性ウイルス; 間葉系幹細胞; 転移性脳腫瘍; ゴールデンハムスター

ゴールデンハムスター由来の癌細胞である悪性黒色腫と乳癌の細胞株選定を行った。腫瘍溶解性ウイルスであるDelta-24-RGDの入手が遅れているため、in vitroの実験が遅れているが、癌細胞株に対する腫瘍殺傷効果を確認する実験を行なった。in vivoの実験として、転移性脳腫瘍のハムスターモデル作成および薬剤頸動脈投与を行うための実験機材、設備を整えた。また、ハムスターの骨髄組織を培養し、間葉系幹細胞の採取、培養を開始するため、院内で動物実験を行うための計画書を作成し承認を得た。生着し増殖する細胞が間葉系幹細胞のクライテリアを満たすことを、形態学的および細胞表面マーカー、分化能などで確認するため、抗体や必要培地など選定を行なった。また、転移性脳腫瘍モデルの作成として、ハムスター由来癌細胞株にLuciferaseを遺伝子導入してから、内頸動脈より動脈注射する実験を行うため、必要な薬品を購入した。一定期間の飼育の後、in vivo イメージングシステムにて腫瘍形成および、s脳内以外に腫瘍形成が起こっていないかを評価するため、撮影機材の使用方法を習得した。

我们选择了恶性黑色素瘤和乳腺癌的细胞系，它们是来自金仓鼠的癌细胞。尽管由于溶瘤病毒Delta-24-RGD获得延迟而导致体外实验被推迟，但我们还是进行了实验来证实对癌细胞系的杀伤作用。对于体内实验，我们准备了实验设备和设备，创建转移性脑肿瘤的仓鼠模型，并向颈动脉给药。此外，为了培养仓鼠骨髓组织并开始收集和培养间充质干细胞，我们制定并获得了在医院内进行动物实验的计划并获得批准。为了根据形态学和细胞表面标志物、分化能力等确认移植和增殖的细胞符合间充质干细胞的标准，我们选择了抗体和必要的培养基。此外，为了创建转移性脑肿瘤模型，我们进行了一项实验，将荧光素酶引入仓鼠来源的癌细胞系中，然后注射到颈内动脉中，因此我们购买了必要的化学品。经过一定时间的饲养，动物学会了如何使用成像设备通过体内成像系统评估肿瘤的形成以及肿瘤的形成是否发生在脑外。

项目成果

MD Anderson Cancer Centernder(米国)

MD 安德森癌症中心（美国）