プロスタノイドEP4受容体高発現大腸がんの治療的探索を目指した機能解析

功能分析旨在探索前列腺素 EP4 受体高表达结直肠癌的治疗作用

基本信息

批准号：
22K15293
负责人：
福島圭穣
金额：
$ 2.91万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

遺伝子ビッグデータの解析により、実臨床の大腸がんには、E型プロスタノイド（EP）受容体サブタイプの発現パターンが明確に異なるがんクラスターが存在する可能性が明らかとなった。本研究では、このEP受容体を特徴的に高発現する各がんクラスターに着目し、その発生・悪性化のメカニズムを明らかにすることを目的とする。2022年度は、がんゲノムビッグデータの解析を完了し、実臨床の大腸がん組織にはEP4受容体の他にも、EP1、EP2、EP3受容体の高発現クラスターがそれぞれ存在することを明らかとした。これらのEP受容体高発現クラスターは、全大腸がん患者のおおよそ1/4を占め、その殆どは単一のEP受容体サブタイプのみを特異的に発現し、互いに異なる遺伝子発現パターンを示した。さらにこの内、最も特徴的な遺伝子発現パターンを示したEP3受容体について、その発現変動遺伝子を抽出して解析を行った。その結果、EP3受容体高発現クラスターは上皮系細胞マーカーの発現が低い一方で間葉系細胞マーカーの発現が高く、さらに上皮間葉転換（EMT）マーカー遺伝子の発現亢進が認められた。以上の結果より、EP3受容体高発現クラスターの大腸がんは、EMTを引き起こした後期がんである可能性が考えられた。同様の解析手法を用い、EP4受容体高発現クラスターなどの他のがんクラスターについても、現在解析中である。さらに、EP4受容体刺激時の細胞応答を明らかにするため、EP4受容体を安定的に発現したヒトHEK293細胞をプロスタグランジンE2で刺激し、その後リン酸化されるタンパク質を網羅的に定量した。その結果、EP4受容体刺激によって有意にリン酸化される約800種類のタンパク質を同定した。これらのタンパク質についても、今後継続して解析してゆく予定である。

对基因大数据的分析表明，实际临床结肠癌中的癌症簇可能具有E型前列腺素（EP）受体亚型的表达模式明显不同。这项研究的重点是特征表达该EP受体的癌症簇，并旨在阐明其发生的机制和恶性转化的机制。在2022年，我们完成了对癌症基因组大数据的分析，表明除EP4受体外，EP1，EP2和EP3受体的高表达簇还存在于实际的临床结肠癌组织中。 EP受体的这些高表达簇占所有结肠癌患者的大约四分之一，其中大多数专门表达了单个EP受体亚型，显示了彼此不同的基因表达模式。此外，其中通过提取在不同基因中表达的基因来分析表现出最独特的基因表达模式的EP3受体。结果，高表达的EP3受体簇表现出上皮细胞标记的低表达，而间充质细胞标记的高表达以及上皮 - 间质转变（EMT）标记基因的表达增加。从上述结果中，认为具有高表达EP3受体的结肠癌可能是引起EMT的晚期癌症。使用相同的分析技术，目前正在分析其他癌症簇，例如EP4受体的高表达簇。此外，为了阐明EP4受体刺激时的细胞反应，用前列腺素E2刺激了稳定表达EP4受体的人HEK293细胞，并全面量化了磷酸化的蛋白质。结果，大约有800种蛋白质被EP4受体刺激显着磷酸化。我们计划将来继续分析这些蛋白质。