間葉系幹細胞によるマクロファージ分極化機構に着目した小児期侵襲性歯周炎治療法開発

间充质干细胞聚焦巨噬细胞极化机制开发儿童侵袭性牙周炎治疗方法

• 批准号: 21K17167
• 负责人: 氏家 隼人
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K17167/
• 关键词: 間葉系幹細胞; 若年性歯周炎; マクロファージ; 侵襲性歯周炎; 侵襲性歯周炎（若年性歯周炎）; Aggregatibacter; actinomycetemcomitance; Lypopolysaccharide (LPS); ラット歯根膜由来間葉系幹細胞様細胞(SCDC2)

本研究では、炎症性サイトカインを産生して若年性歯周炎を惹起することが知られている炎症性マクロファージ（M1-MΦ）を、間葉系幹細胞（MSC）が有する免疫寛容能力により抗炎症性マクロファージ（M2-MΦ）に分極化させ、このM2-MΦを用いた消炎細胞治療の樹立の可能性を探求することを目的としている。初年度（2021年度）までに、マウス脛骨の骨髄より採取した骨髄組織より抽出した血球系細胞が、これと共培養されたMSCが産生するサイトカインや接着因子によりM2-MΦに分極化しうる細胞培養系の再現性について確認した。そこで、2022年度は、将来的なM2-MΦの消炎細胞治療への応用を目指すために、マウス末梢血からのM2-MΦの大量調製が可能かどうかについての調査を進めた。その結果、予測とは異なり、マウス末梢血由来の単球/MΦ系細胞は、MSC由来のサイトカインの刺激のみでM2-MΦへと分極化させられることが判明した。このことは、以前に報告したマウス骨髄由来血球細胞よりも、マウス末梢血由来単球/MΦ系細胞を用いた方が、簡便にM2-MΦを調整できることを意味している。このように、今後は、本研究課題のin vitroあるいはin vivoにおける実験には、マウス末梢血由来単球/MΦ系細胞を用いることが可能となった。現在は、このマウス末梢血由来単球/MΦ系細胞が、MSCとの共培養にて、M2-MΦ様の性質が維持されるのかどうかについてのin vitroでの調査を開始したところである。この調査により、MSCがM2-MΦのM1-MΦへの再分極化を抑止するのであれば、本研究が目的とするM2-MΦとMSCの二種の細胞を用いた抗若年性歯周炎細胞治療の実現性が見込めるものと考えている。

在这项研究中，我们证明了已知会产生炎症细胞因子并引起幼年牙周炎的炎症巨噬细胞（M1-MΦ）利用间充质干细胞（MSC）的免疫耐受能力具有抗炎作用。将细胞极化为炎症巨噬细胞（M2-MΦ），并探索利用M2-MΦ建立抗炎细胞疗法的可能性。到第一年（2021财年），我们将开发一种细胞培养物，其中从小鼠胫骨收集的骨髓组织中提取的血细胞可以通过与这些细胞共培养的间充质干细胞产生的细胞因子和粘附因子极化为M2-MΦ系统的再现性得到了证实。因此，我们在2022年进行了一项研究，研究是否可以从小鼠外周血中大量制备M2-MΦ，以期将来将M2-MΦ应用于抗炎细胞治疗。结果显示，与预期相反，来自小鼠外周血的单核细胞/MΦ细胞仅通过来自MSC的细胞因子的刺激就极化为M2-MΦ细胞。这意味着使用小鼠外周血来源的单核细胞/MΦ谱系细胞比之前报道的小鼠骨髓来源的血细胞更容易调整M2-MΦ。这样，本研究项目就可以使用小鼠外周血来源的单核细胞/MΦ细胞进行体外或体内实验。我们目前正在开始一项体外研究，以确定这些小鼠外周血来源的单核细胞/MΦ 细胞在与 MSC 共培养时是否保持其 M2-MΦ 样特性。根据这项研究，如果 MSC 抑制 M2-MΦ 向 M1-MΦ 的复极化，本研究旨在使用 M2-MΦ 和 MSC 两种类型的细胞来抗幼年牙周炎。