新規核酸増幅法を用いた口腔がん特異的な唾液由来miRNAの検出

使用新型核酸扩增方法检测口腔癌特异性唾液来源的 miRNA

基本信息

批准号：
21K16939
负责人：
坂田健一郎
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16939/
关键词：
microRNA 口腔がん新規核酸増幅法唾液 miRNA SATIC法

项目摘要

microRNA（miRNA）は腫瘍組織中で高発現し、その特異性は腫瘍マーカーより高い。申請者は現在、口腔癌診療を行っている中で、無侵襲に解析できる唾液を病態解明、早期診断、早期治療、薬剤効果、転移や再発の検知に用いることができないかと着想した。口腔癌の主な治療は外科的切除であるが、術後に発音、咀嚼障害、嚥下、整容面などの機能障害を引き起こすため早期発見が重要である。口腔がん患者の唾液から、signal amplification by ternary initiationcomplexes法（SATIC法）を用いてmiRNAを検出する。SATIC法は、RNAのまま短時間で核酸増幅が可能であり、唾液から20分以内に腫瘍特異的miRNAを検出する手法を開発する。SATIC法は通常のPCR法に代わる、技術革新である。Covid19の迅速診断法で注目されており、PCR法と異なり核酸（DNAやRNA）の抽出が不要であり、特定の装置(高速温度制御装置）などが必要なく安価で早く、高感度で定量性があるという利点がある。SATIC法を用いることで、がんや生活習慣病に関わる遺伝子や細菌やウイルスのゲノム等の特定遺伝子、特異タンパク質、microRNAが検出可能で、最終的にナノ磁性ビーズの凝集の有無により可視化(蛍光発光)し判定する方法である。低侵襲で簡便に採取可能で、歯科医師として日常診療で馴染みの深い唾液を検体として用いることができる。

microRNA（miRNA）在肿瘤组织中高度表达，其特异性高于肿瘤标记。尽管目前正在接受口腔癌治疗，但申请人考虑了是否可以无侵入性地进行分析的唾液可以用来阐明病理状况，早期诊断，早期治疗，药物作用以及检测转移和复发。手术切除是口腔癌的主要治疗方法，但早期发现很重要，因为它会引起手术，咀嚼性疾病，吞咽和质量表面等功能障碍。使用三元起始复合物（Satic）的信号扩增，在口腔癌患者的唾液中检测到miRNA。 Satatic方法允许在短时间内放大核酸，因为它是RNA，并开发了一种在唾液后20分钟内检测肿瘤特异性miRNA的方法。 Satatic方法是一种替代通常的PCR方法的技术创新。它引起了人们对COVID19快速诊断方法的关注，与PCR不同，它不需要提取核酸（DNA和RNA），并且具有不需要特定的设备（高速温度控制设备）的优势，它是便宜，快速，高度敏感和定量的。通过使用Satatic方法，可以检测到与癌症和与生活方式相关疾病，特定蛋白质和microRNA有关的特定基因，以及最终可视化（荧光发射），并根据纳米磁降聚合的存在或不存在。收集它是最少的侵入性和方便的，并且可以使用唾液，这是牙医的日常练习，作为标本。