メニエール病モデル動物における内耳水代謝関連タンパクの発現変化に関する研究

梅尼埃病模型动物内耳水代谢相关蛋白表达变化的研究

基本信息

批准号：
21K16826
负责人：
木下淳
金额：
$ 2.91万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K16826/
关键词：
メニエール病内リンパ水腫プロテオーム解析前庭めまい

项目摘要

メニエール病の内耳病態が内リンパ水腫であることが報告されて久しいが、内リンパ水腫形成のメカニズムについては未だ十分な解明が成されていない。内リンパ水腫の形成が内耳における水代謝の恒常性維持機構の破綻と捉えるならば、メニエール病の病態解明のためには、内耳水代謝関連タンパクに関する制御機構の解析が必要不可欠である。本研究では、メニエール病のモデル動物を作成し、内耳における水代謝関連タンパクの発現変化をプロテオーム解析を用いて網羅的に解析し、発現変化のみられたタンパク質を中心に免疫組織学的な検証を行う。さらに、臨床的にメニエール病治療に有効とされている塩分制限食による内リンパ水腫の軽減効果を同モデル動物を用いて神経耳科学的検査、画像検査、組織学的手法で検証する予定である。2021年から2022度は内リンパ嚢発育不全モデル動物として6週齢のC57BL/6Jマウスの内リンパ嚢を電気焼灼により閉塞し、4週間飼育することで作成することとした。同モデルと偽手術を行ったマウスにおいて、蝸牛前庭における内リンパ水腫形成の有無を組織学的に解析中である。また、今後の治療効果の検証に用いる予定である、聴性脳幹反応（ABR）検査や前庭誘発頸筋電位(cVEMP)検査、前庭誘発嚢電位（VsEP）検査、カロリック検査についてマウスを用いて測定できるようにセットアップを行った。プロテオーム解析および動物用高磁場MRIによるin vivoでの内リンパ水腫撮影については鋭意準備を進めている。

据报道，很久以来，梅尼尔氏病的内耳病理学是内淋巴水肿，但是内淋巴水肿的形成机理尚未完全了解。如果内淋巴水肿的形成是内耳中水代谢的稳态维持机制的分解，那么对与内耳代谢相关蛋白有关的调节机制的分析对于阐明Meniere病的病理是必不可少的。在这项研究中，使用蛋白质组学分析对内耳中水代谢相关的蛋白质表达的表达变化进行了全面分析，并进行了免疫组织化学验证，重点关注仅表达的蛋白质。此外，通过使用神经脚趾检查，成像测试和组织学方法来验证，由于盐限制饮食在临床上有效治疗Meniere病具有临床上有效治疗Meniere疾病的饮食，减少内淋巴水肿的作用。从2021年到2022度，我们决定创建一种模型动物，该模型动物具有内淋巴囊的6周龄C57BL/6J小鼠，这些小鼠在2022度通过电动疗法在2022度中是无菌的，然后保存4周。目前正在通过相同模型进行假手术的小鼠中分析人工耳蜗前庭中的内淋巴水肿形成或不存在。此外，我们设置了听觉脑干反应（ABR），前庭诱导的宫颈功能障碍（CVEMP），前庭诱导胶囊电位（VSEP）和热量测试的测试，这些测试计划用于验证将来治疗的有效性，以便使用小鼠来测量它们。我们正在积极准备蛋白质组学分析和体内内淋巴水肿成像，并使用高场动物磁场MRI进行成像。