Study on invasion potential of Helicobacter pylori uninfected signet ring cell gastric cancer

幽门螺杆菌未感染印戒细胞胃癌侵袭潜力的研究

• 批准号: 21K15927
• 负责人: 小刀 崇弘
• 金额: $ 2.16万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K15927/
• 关键词: ヘリコバクターピロリ未感染; 印環細胞癌; 未分化型胃癌; 浸潤癌; 未感染胃癌; Helicobacter pylori; SRCC; gastric cancer

本研究は当院でヘリコバクターピロリ未感染未分化型胃癌での浸潤先進部でどのような遺伝子異常が起こっているかを癌ゲノム解析を用いて明らかとしていく研究である。この変化を明らかにするためにヘリコバクターピロリ除菌後未分化型胃癌の浸潤先進部でどのような遺伝子異常が起こっているかを検索しコントロールとして未感染癌の変化について明らかにする研究である。これまでに内視鏡治療もしくは手術で治療したヘリコバクターピロリ未感染未分化型胃癌36症例39病変のうち、粘膜下層以深への浸潤を認めた7症例7病変の粘膜内印環細胞癌成分と浸潤部の低分化腺癌成分をそれぞれレーザーマイクロダイセクションにて切り出し，市販の抽出キットを用いてgDNAの抽出を行った。Qubitを用いてDNA量を測定したところ次世代シークエンサーの解析に十分な量のDNAを採取することができた。また粘膜下層以深への浸潤を認めたヘリコバクターピロリ除菌後未分化型胃癌7症例7病変の粘膜内印環細胞癌成分と浸潤部の低分化腺癌成分からもそれぞれレーザーマイクロダイセクションにて切り出し，同様に抽出キットを用いてgDNAの抽出を行った。同症例においてもQubitを用いてDNA量を測定したところ次世代シークエンサーの解析に十分な量のDNAを採取することができた。さらにこれらの症例のDNAのQualityを測定するためにAgilent社のtapestationのGenomic DNAを用いてDIN値の測定を行った。さらに経年劣化によるDNAの断片化の程度を測定するためqPCRによるDNA定量をΔΔQCを用いて測定を行った。

本研究是我院利用癌症基因组分析进行的一项研究，旨在明确未感染幽门螺杆菌的未分化胃癌的晚期侵袭区发生了什么样的基因异常。为了阐明这种变化，我们正在进行一项研究，以了解根除幽门螺杆菌后未分化胃癌的晚期侵袭区域发生了什么样的基因异常，并阐明作为对照的未感染癌症的变化。经内镜或手术治疗的36例、39个未感染幽门螺杆菌的未分化胃癌病灶中，有7例、7个病灶已浸润至粘膜下层及以下，有粘膜内印戒细胞癌成分且浸润分化差。通过激光显微切割切除每个肿瘤的腺癌成分，并使用市售提取试剂盒提取 gDNA。当我们使用 Qubit 测量 DNA 量时，我们能够收集足够的 DNA 用于下一代测序仪分析。此外，7例未分化胃癌根除幽门螺杆菌后，已侵入粘膜下层深处的粘膜内印戒细胞癌成分和浸润区的低分化腺癌成分也被激光显微切割切除，使用相同的提取试剂盒提取 gDNA。当我们使用 Qubit 测量同一病例的 DNA 量时，我们能够收集足够的 DNA 用于下一代测序仪分析。此外，为了测量这些病例的 DNA 质量，我们使用安捷伦磁带站的基因组 DNA 测量了 DIN 值。此外，为了测定因老化而导致的DNA断裂的程度，使用ΔΔQC进行基于qPCR的DNA定量。

项目成果

Helicobacter pylori 未感染未分化型浸潤癌の臨床的特徴

幽门螺杆菌未感染未分化浸润性癌的临床特征

• 发表时间: 2021
• 作者: Uchida Takuro;Teraoka Yuji;Imamura Michio;Abe‐Chayama Hiromi;Makokha Grace Naswa;Hayes Clair Nelson;Aikata Hiroshi;Hamamura Satoko;Ishida Yuji;Tateno Chise;Shirouzu Takayuki;Kawai Shintaro;Tanaka Yuka;Ohdan Hideki;Okada Seiji;Chayama Kazuaki;寺岡 雄吏・今村 道雄・茶山 一彰;小刀崇弘，保田智之，田中信治，頼田尚樹，木曽まり子，二宮悠樹， Madina Abuduwaili，長﨑直子，岡 志郎，日山 亨，伊藤公訓，吉原正治，茶山一彰
• 通讯作者: 小刀崇弘，保田智之，田中信治，頼田尚樹，木曽まり子，二宮悠樹， Madina Abuduwaili，長﨑直子，岡 志郎，日山 亨，伊藤公訓，吉原正治，茶山一彰