印環細胞型胃癌の内皮細胞依存的スキルス性獲得メカニズムの解析と標的治療

印戒细胞胃癌内皮细胞依赖性硬质获得机制及靶向治疗分析

• 批准号: 21K15965
• 负责人: 畑 昌宏
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K15965/
• 关键词: 胃癌; スキルス胃癌; 腫瘍免疫微小環境; 腫瘍周囲微小環境

本研究はヒトの印環細胞型胃癌、いわゆるスキルス胃癌を模倣する独自のマウスモデル（Tff1-Cre; LSL-p53 R172H; Tgfbr2 F/F; Cdh1 F/F、T1-PTCマウス）を用いて、浸潤性胃癌組織全体のスキルス性獲得メカニズムを解析し、それを抑制することで生命予後延長に繋げることを目標としている。本年度は、CD38特異的中和抗体・CD105特異的抗体(TRC-105)による治療後腫瘍の各細胞分画の遺伝子解析を試みた。しかし、治療マウスのFACSによる各細胞の回収に難渋し、CD38抗体治療後腫瘍のCAFのみ解析が可能となったためその結果を示す(元々線維化が強い組織であることや治療後の変化による細胞数減少などが原因と推測している)。T1-PTCマウス、T1-PCマウス、CD38抗体治療マウスの3群で主成分解析を施行すると、腫瘍細胞におけるTgfbr2 KOが腫瘍内CAFにもたらす遺伝子的変化をCD38抗体が部分的にキャンセルしていると考えられた。そこでT1-PCのCAFに比しT1-PTCのCAFで発現が上昇し、かつCD38抗体治療によって発現が低下した遺伝子を抽出し解析を行ったところ、CAFにおけるサイトカインやインターフェロンγに対する反応、線維芽細胞増殖因子への応答に関する遺伝子群が特定され、すなわち線維芽細胞増殖(線維化)がCD38抗体治療によって軽減していることが示唆された。具体的な遺伝子としては、Ccl12・Flrt3・FGF9・Trpm2・Vav2が含まれており、これらがスキルス胃癌におけるTgfbr2 KOとCD38発現に関連し、線維化に寄与している可能性があると考えられた。

这项研究使用了一种独特的小鼠模型（Tff1-Cre；LSL-p53 R172H；Tgfbr2 F/F；Cdh1 F/F，T1-PTC 小鼠），模拟人类印戒细胞胃癌，即所谓的硬质胃癌。是从整体上分析侵袭性胃癌组织中硬性获得的机制，并抑制这种机制以延长生命预后。今年，我们尝试对用 CD38 特异性中和抗体和 CD105 特异性抗体 (TRC-105) 治疗后的肿瘤的每个细胞部分进行基因分析。然而，通过FACS从治疗的小鼠中收集每个细胞是很困难的，并且在CD38抗体治疗后只能分析肿瘤的CAF，所以结果显示在这里（因为组织本来是高度纤维化的，细胞是假设这是由于治疗后变化的影响）。对T1-PTC小鼠、T1-PC小鼠和CD38抗体治疗小鼠这三组进行的主成分分析表明，CD38抗体部分抵消了瘤内CAF肿瘤细胞中Tgfbr2 KO带来的遗传变化。因此，我们提取并分析了与 T1-PC 的 CAF 相比，T1-PTC 的 CAF 中的表达增加，并且通过 CD38 抗体处理其表达减少的基因群，这表明与细胞生长因子的反应相关的基因。 CD38 抗体治疗可减少增殖（纤维化）。特定基因包括 Ccl12、Flrt3、FGF9、Trpm2 和 Vav2，这些基因被认为与硬质胃癌中 Tgfbr2 KO 和 CD38 的表达相关，并可能导致纤维化。

项目成果

印環細胞型胃癌の腫瘍周囲微小環境の解明と新規治療標的の導出

印戒细胞型胃癌瘤周微环境的阐明及新治疗靶点的推导

• 发表时间: 2022
• 作者: 畑昌宏