Elucidation of the pathogenesis of endoplasmic reticulum stress in congenital neutropenia based on proteome analysis

基于蛋白质组分析阐明先天性中性粒细胞减少症内质网应激的发病机制

基本信息

批准号：
21K15905
负责人：
溝口洋子
金额：
$ 2.91万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K15905/
关键词：
好中球減少症 ELANE異常症小胞体ストレス先天性好中球減少症

项目摘要

１年目においては、プロテオーム解析で示された結果の正確性について、先天性好中球減少症(CN)患者の好中球を用いて、実際にGSTP1の低下及び小胞体ストレス(UPR)亢進が認められるか、immunoblotting法を用いて検証を行った。ELANE異常症、SRP54異常症、周期性好中球減少症のすべてのCN患者において、GSTP1の低下と、UPRの指標であるBipの上昇を認めた。またUPR以外の他のアポトーシス関連因子についても検討を行った結果、発現上昇を認めた。これらはプロテオーム解析で得られた結果と同等の結果であった。次に正常iPS細胞を用いてCRIPR/Cas9法によるGSTP1遺伝子の遺伝子破壊を施行し、CNにみられる好中球分化障害が認められるか検討を行ったが、分化障害はみられなかった。GSTP1の単独欠損のみでは好中球分化へ影響がないことが示されたため、さらなる分子学的病態について解析を行うため、ELANE異常症患者由来iPS細胞(CN-iPSC)において、ELANE遺伝子をCRIPR/Cas9法を用いて遺伝子破壊を行い(CN-iPSC-NE KO)、好中球分化障害に改善が得られるか検討したところ、分化障害の改善を認めた。２年目において、CN-iPSC、CN-iPSC-NE KO、正常iPSC由来好中球前駆細胞をsortし、RNA-seqを施行した結果、CN-iPSC、CN-iPSC-NE KOの間で主にanti-oxidant経路の遺伝子量のdysregulationが認められた。CNの病態にUPR関連(Bip, Chop, ATF4)のみならず、酸化ストレスが関わっていることが示唆された。

在第一年，使用先天性良好的中性粒细胞（CN）患者的中性粒细胞验证了GSTP1的五型结果的准确性和增强（UPR）增强（UPR）。方法。在所有CN患者中，具有Elane异常，SRP54异常和周期性嗜中性粒细胞的患者，GSTP1的降低和BIP的上升，这是UPR的指标。另外，由于检查了除UPR以外的其他相关因素，因此被识别出来。这些与通过五方分析获得的结果相同。接下来，使用正常IPS细胞进行了通过CRIPR/CAS9方法对GSTP1基因的基因破坏，并检查了是否观察到CN上发现的中性粒细胞障碍，但没有发现分化。由于单独的GSTP1对中性粒细胞的分化没有影响，因此在Elane异常患者（CN-IPSC）中，CRIPR/ CRIPR/ Elane基因是IPS细胞中的CRIP（CN-IPSC），以进一步分析分子病理学。 CAS9定律（CN-IPSC-NE KO），并认为可以改善嗜中性疾病的改善。在第二年，CN-IPSC，CN-IPSC-NE KO，正常的IPSC衍生的良好中性中性中性粒细胞是排序的，并且进行了RNA-SEQ，并且主要在CN-IPSC和CN-IPSC-NE KO之间进行RNA-SEQ观察到抗氧化途径中的基因。有人提出，CN条件不仅参与了与UPR相关的（BIP，CHOP，ATF4），还涉及氧化应激。

项目成果

期刊论文数量（3）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

The efficacy of continuous US evaluation for joint health in pediatric patients with hemophilia.

连续超声评估血友病儿科患者关节健康的功效。

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Yoko Mizoguchi;Chihiro Tani;Shiho Nishimura;Keiko Matsubara;Keita Tomioka;Maiko Shimomura;Yuko Nakashima;Hiroshi Kawaguchi;Satoshi Okada and Masao Kobayashi.
通讯作者：
Satoshi Okada and Masao Kobayashi.

小児血友病患者における関節症予防のために定期的な関節超音波評価の重要性

定期关节超声评估对于预防儿童血友病患者关节病的重要性。

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Mizoguchi Yoko;Okada Satoshi;溝口洋子
通讯作者：
溝口洋子

血友病個別化治療の実践に向けた当科の取り組み

我科致力于血友病实施个体化治疗

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
溝口洋子;小林正夫
通讯作者：
小林正夫

血友病診療の現在と未来

血友病治疗的现状和未来

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Yoko Mizoguchi;Chihiro Tani;Shiho Nishimura;Keiko Matsubara;Keita Tomioka;Maiko Shimomura;Yuko Nakashima;Hiroshi Kawaguchi;Satoshi Okada and Masao Kobayashi.;溝口洋子
通讯作者：
溝口洋子

Inherited CARD9 Deficiency in a Child with Invasive Disease Due to Exophiala dermatitidis and Two Older but Asymptomatic Siblings