Non-Destructive Measurement of Target Protein Content in Leaves for Plant-Made Pharmaceutical Protein Production

用于植物药用蛋白生产的叶子中目标蛋白含量的无损测量

• 批准号: 24658217
• 负责人: FUJIWARA Kazuhiro
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24658217/
• 关键词: 生体情報計測; インフルエンザワクチン; ベンサミアナタバコ; 一過性遺伝子発現; クロロフィル蛍光; 光合成

In this study, we aimed at developing a non-destructive measurement technique using chlorophyll (Chl) fluorescence to quantify pharmaceutical protein content in leaves in a viral vector-based transient gene expression system using whole plants. A plasmid vector containing a cDNA of hemagglutinin (HA), an influenza vaccine antigen, as well as a tobamoviral replicon, was introduced into Nicotiana benthamiana plants via vacuum-infiltration with the transformed agrobacteria. The HA protein content in leaves increased from 3 d to 6 d after the gene introduction event. Simultaneously, the photosynthetic capacity of leaves markedly declined. It was demonstrated that this decrease in photosynthetic capacity can be detected by measuring Chl fluorescence parameters including the quantum efficiency and thermal dissipation activity of photosystem II, suggesting that the Chl fluorescence measurement can potentially be a useful technique for monitoring the dynamics of HA content in leaves.

在这项研究中，我们旨在使用叶绿素（CHL）荧光开发一种非破坏性测量技术，以使用整个植物的基于病毒载体的瞬态瞬态基因表达系统中的叶子中的药物蛋白含量进行量化。含有血凝素（HA）的cDNA的质粒载体，一种流感疫苗抗原以及烟叶复制品，通过真空浸入烟草中，引入了烟草本植物，并带有变化的农民杆菌。叶片中的HA蛋白含量从基因引入事件发生后的3 d增加到6 d。同时，叶子的光合作用能力显着下降。证明可以通过测量CHL荧光参数（包括光系统II的量子效率和热耗散活性）来检测到光合作用能力的这种下降，这表明CHL荧光测量可能是一种有用的技术，可用于监测叶片中HA含量的动态。

项目成果

ベンサミアナタバコを用いた抗体医薬・ワクチンの開発と植物工場での迅速生産

利用本塞姆氏烟草开发抗体药物和疫苗并在植物工厂快速生产

• 发表时间: 2014
• 期刊: バイオサイエンスとインダストリー
• 作者: 野村耕太;伊藤博通;濱田佳代;綾田晃士;白石斉聖;宇野雄一;藤内直道,松田怜,的場伸行,富士原和宏;的場伸行,松田怜
• 通讯作者: 的場伸行,松田怜

Effect of nitrate concentration in nutrient solution on hemagglutinin content of Nicotiana benthamiana leaves in a viral vector-mediated transient gene expression system

• DOI: 10.5511/plantbiotechnology.14.0403a
• 发表时间: 2014-01-01
• 期刊: PLANT BIOTECHNOLOGY
• 影响因子: 1.6
• 作者: Fujiuchi, Naomichi;Matsuda, Ryo;Fujiwara, Kazuhiro
• 通讯作者: Fujiwara, Kazuhiro

植物バイオテク産業に「農業」が果たす役割

农业在植物生物技术产业中的作用

• 发表时间: 2013
• 作者: 野村耕太;伊藤博通;濱田佳代;綾田晃士;白石斉聖;宇野雄一;藤内直道,松田怜,的場伸行,富士原和宏;的場伸行,松田怜;Fujiuchi et al.;的場伸行・松田 怜;松田怜,田原亜希,的場伸行,富士原和宏;松田怜
• 通讯作者: 松田怜