analysis of function and establishment of specific marker of pancreatic cancer stem cell by using sphere formation assay

成球实验分析胰腺癌干细胞功能及特异性标志物的建立

• 批准号: 18K16376
• 负责人: 清水 徹之介
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Osaka Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K16376/
• 关键词: 膵癌幹細胞; スフィア; S100A4; sphere; 癌幹細胞; 膵癌; pancreatic cancer; cancer stem cell

本研究ではこれまで、スフィアを継代する事でスフィア形成率が増加する結果を得た。果たしてこれらの細胞集塊が癌幹細胞もしくはそれに準じた何らかの機能を持った細胞であるのかに関しては検証が必要な状態であった。機能解析にはスフィアの大量作成が必要であるが、その時点ではコスト面などから効率的ではなく、まずは表面抗原マーカーなどの指標を検討した。スフィアの形状(いびつなものから完全な球形のもの)によってS100A4タンパク発現の局在が異なる事が分かった。また電子顕微鏡による観察により、Golgi体に局在している事も分かった。一方でSphere形成後ではS100A4の発現が有意に低下しており、E-cadherinと相関関係にある事が分かった。S100A4タンパクは癌幹細胞の表面抗原マーカーとしても知られており、また一般的にS100A4を高発現する膵癌は、低発現の膵癌より予後が悪い事が分かっている。今回得られた、スフィアでS100A4が低発現であるという結果は、スフィアが悪性度の高い細胞集塊とするならば、矛盾する結果であった。これにより、スフィア構成細胞の機能解析が重要となり、一度に多量の細胞を作成し、浸潤能などを研究する必要がある。

到目前为止，这项研究通过接管球体导致球体形成率的提高。这些细胞是具有癌细胞或某些等效功能的细胞所必需的。功能分析需要大量的球体，但是当时，它在成本方面并不有效，并且首先检查了表面抗原标记等指标。发现S100A4蛋白的表达取决于球体的形状（从变形的事物到完整的球形）。用电子显微镜观察表明，它位于高尔基体中。另一方面，在球体形成后，S100A4的表达显着降低，发现它与E-钙粘着蛋白相关。 S100A4蛋白也被称为癌症干细胞的表面抗原标记，众所周知，通常表达S100A4的胰腺癌的预后比低表达胰腺癌的预后差。如果球体是高度恶性细胞，则S100A4在这段球体中表达较低的结果是矛盾的结果。结果，对长矛配置的细胞的功能分析很重要，必须立即创建大量细胞并研究浸润。