HSP90とがん幹細胞様細胞マーカーCD１３３の相互作用とがん治療抵抗性との関係

HSP90与癌症干细胞样细胞标志物CD133之间的相互作用及其与癌症治疗耐药的关系

• 批准号: 18K15638
• 负责人: 藤井 義大
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Nihon institute of Medical Science (2022)Ibaraki Prefectural University of Health Science (2018-2021)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K15638/
• 关键词: cancer stem cell; CD133; HSP90阻害剤; がん幹細胞; HSP90; Hsp90阻害剤

本研究は、放射線抵抗性細胞（CD133陽性細胞）におけるHSP90阻害剤の有効性を明らかにし、その作用機序を解明することを目的としている。CD133陽性細胞に対するHSP90阻害剤の有効性は、コロニー形成法により細胞の生存率が非常に低下することで確認している。HSP90の阻害剤は複数種類を試しており、１種類のみの特異的なものとは考えにくい。さらに追加でTAS-116でも実験を行っている。また、蛍光免疫染色法によりCD133タンパク質とHSP90タンパク質の細胞内での共局在の可能性も確認できたので、２つのタンパク質の細胞内での相互作用を示唆する実験データを得ることができた。そこで、２つのタンパク質の相互作用の有無の確証を得るために、免疫沈降法によりCD133タンパク質とHSP90タンパク質との相互作用の有無を確認中である。以前までに、相互作用は確認できておらず、実験条件等を検討中である。また、CD133とHSP90との関係が直接的なものなのか間接的なものなのかを確認する実験の一つとして、siRNAをもちいてCD133もしくはHSP90をノックダウンした細胞においてHSP90阻害剤の効果（細胞の生存率）が変化するかどうかも確認中である。上記のTAS-116によるCD133陽性細胞への効果を調べたところ、細胞生存率の低下によってその効果が追加で確認できたが、現在再現性を確認し、その信ぴょう性を確認中である。また、現在のところ免疫沈降法によるCD133とHSP90との相互作用の有無を確認することができていない。

本研究旨在阐明HSP90抑制剂对放射抗性细胞（CD133阳性细胞）的有效性并阐明其作用机制。 HSP90 抑制剂针对 CD133 阳性细胞的有效性通过以下事实得到证实：细胞活力因集落形成而显着降低。多种类型的 HSP90 抑制剂已被测试，不可能只有一种类型是特异性的。此外，TAS-116 也正在进行实验。此外，我们能够使用荧光免疫染色证实CD133和HSP90蛋白在细胞内共定位的可能性，并且能够获得表明两种蛋白之间存在细胞内相互作用的实验数据。因此，为了确认两种蛋白之间是否存在相互作用，我们目前正在通过免疫沉淀来确认CD133蛋白和HSP90蛋白之间是否存在相互作用。迄今为止，尚未证实存在相互作用，目前正在考虑实验条件。此外，作为确认CD133和HSP90之间的关系是直接还是间接的实验，我们进行了一项实验，以确定HSP90抑制剂对使用siRNA敲低CD133或HSP90的细胞的效果。生存率（survival rates）发生变化。当我们研究上述TAS-116对CD133阳性细胞的影响时，由于细胞活力下降，我们能够额外确认这种影响，但我们目前正在验证其再现性并确认其真实性。此外，还不可能通过免疫沉淀来确认CD133和HSP90之间是否存在相互作用。