腫瘍融解アデノウイルスの骨軟部肉腫に対する放射線感受性増幅効果とそのメカニズム

溶瘤腺病毒对骨软组织肉瘤的放射增敏作用及其机制

基本信息

批准号：
18K15242
负责人：
小松原将
金额：
$ 2.5万
依托单位：
National Cancer Center Japan
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-01 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

HT1080(Fibrosarcoma)とは別の軟部肉腫細胞株（SW684(Fibrosarcoma）)に関しても、コントロール、OBP-702単剤、放射線療法単剤、OBP-702＋放射線療法併用の4群でin vitroで加療を行い、併用療法の相加相乗効果の評価を行った。抗腫瘍効果をXTTアッセイ、相加相乗効果をCalcuSyn softwareを用いて解析を行った。結果として、HT1080と同様にOBP-702と放射線を併用することで抗腫瘍効果、相加相乗効果を認めるものの、HT1080ほどの効果はないことを確認した。これにより、同種の肉腫細胞によっても、OBP-702の併用による効果に差が生じるが確認された。また、別に同様の4群の処理を行った細胞のタンパクを回収し、それぞれのアポトーシス経路やDNA損傷修復過程を中心とした機序におけるターゲットの選定し、OBP702が抗アポトーシス蛋白（MCL-1、BCL-XL)を抑制することで腫瘍細胞のアポトーシスを誘導する可能性が確認された。上記の裏付けのためにsiRNAでMCL-1,BCL-XLの発現を抑制し、放射線感受性を評価したところ、ともに増強することを確認し、さらにMCL-1よりもBCL-XLの方が優位にアポトーシスを誘導することも示唆された。また、OBP-702を使用することで、特定のタンパク発現（E1A,E2F1,p53）により、上記の抑制効果が誘導されていることも示唆された。in vivoにおいては、併用群で優位に抗腫瘍効果を認め、腫瘍組織免疫染色でも腫瘍増殖能の低下を認めた。現在、今までの結果と上記結果に基づき、論文執筆中である。

关于软组织肉瘤细胞系（SW684（纤维肉瘤），它们与HT1080（纤维肉瘤）分开，在四组中进行了体外治疗：对照组，单独进行OBP-702，单独放射疗法，OBP-702加上放射治疗，以及使用添加剂的添加剂进行了添加效果。使用钙质效果进行了协同效应。收集了四组的处理，并选择了每种机制的靶标，主要是在凋亡途径和DNA损伤修复过程中，并证实OBP702可以通过抑制抗凋亡蛋白（MCL-1，BCL-XL）来诱导肿瘤细胞凋亡。对于上述支持，siRNA抑制了MCL-1和BCL-XL的表达，并评估了放射敏感性，并证实了它们两个都得到了增强，并且还建议BCL-XL比MCL-1诱导凋亡具有优势。还建议使用OBP-702的使用会诱导由于特定蛋白表达而引起的上述抑制作用（E1A，E2F1，p53）。在体内，组合组显示出主要的抗肿瘤作用，肿瘤组织免疫染色显示肿瘤生长能力降低。目前，我正在根据迄今为止的结果以及上述结果撰写论文。