Construction of vascular networks and hepatic lobule in decellularized liver

脱细胞肝脏血管网络和肝小叶的构建

基本信息

批准号：
18K14068
负责人：
白木川奈菜
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-01 至 2019-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18K14068/
关键词：
肝臓組織工学臓器工学脱細胞化血管化

项目摘要

本研究は「脱細胞化肝臓の作製」、「肝小葉の種、及びそれを用いた肝小葉の構築」、「脱細胞化肝臓内における血管網の構築」、そしてこれらを組み合わせることによる「脱細胞化肝臓内における血管網の構築及び肝小葉の構築」を目指した。臨床で使える技術の開発を目指し、ヒト初代肝細胞を用いた小スケールでの薬剤評価等を想定した肝臓再構築及び臓器構築時の培養系の開発、また、移植を想定した人工胆管の開発を行った。ヒト初代肝細胞を用いた小スケールでの薬剤評価等を想定した肝臓再構築として、既往の研究よりもさらに小さいマウス肝臓を用いた脱細胞化肝臓作製法を開発を目指した。界面活性剤を経門脈的に流入することで、緻密な血管構造を維持したマウス脱細胞化肝臓の作製に成功した。さらに、初代肝細胞を播種し、培養することで肝機能発現が認められた。本研究を応用することで限られた細胞源を用いた小スケールでのヒト肝臓構築が期待され、薬剤評価等への利用が期待される。また、肝小葉の構築を目指し、ドーナツ型培養パックやメチルセルロース添加培地による集塊培養の検討を試みた。前述の脱細胞化肝臓内で組織を構築するためには、今回得られた知見を応用し、複数種類の細胞の混合播種が必要であると考えられる。さらに、臓器構築時の培養系の開発を目指し、ラット肝臓の培養を試みた。赤血球及び血液添加培地により酸素供給の向上が示唆され、臓器の機能維持に有用なことが期待された。本成果は臓器移植時の移植臓器の運搬等への応用も期待される。一方、肝臓を移植する際に必要となる人工胆管の開発も行った。エラスチンを溶解して静電紡糸することで、チューブを構築することに成功した。本研究を応用し、生体肝移植時等にも使用可能な生体置換性人工胆管の開発が期待される。上記各技術を組み合わせながら発展させることで、臨床応用可能な肝臓の構築及び構築した肝臓の移植達成が期待される。

这项研究旨在“创建脱皮的肝脏”，“使用它们构建肝小叶和肝小叶的种类”，“在脱细胞肝脏中构建血管网络”，并“在脱胶化的肝脏中构建血管网络，并构建肝叶小叶，并构建肝脏小叶。”目的是开发可用于临床实践的技术，并考虑使用人类原发性肝细胞的小规模药物评估，并开发用于器官构建的肝脏重建和培养系统，并开发用于移植的人造胆管。我们旨在开发一种使用小鼠肝脏产生脱细胞肝脏的方法，该方法比以前的研究小，作为一种肝脏重建，该肝脏重建使用人类原发性肝细胞进行小规模的药物评估。通过将表面活性剂流过门静脉，我们成功地创建了一种保持密集的血管结构的小鼠脱细胞肝脏。此外，当将原发性肝细胞接种并培养时，观察到肝功能。通过应用这项研究，预计将使用有限的细胞来源进行小规模的人类肝脏结构，并且它将用于药物评估等。此外，为了构建肝小叶，我们试图使用甜甜圈型培养物和甲基细胞增添的培养基来研究集聚的培养物。人们认为，要在脱细胞肝脏中构造组织，必须将此时间应用于混合多种细胞的播种的结果。此外，我们试图培养大鼠肝脏，目的是开发一种用于器官构建的培养系统。红细胞和血液添加的培养基表明氧气供应有所改善，预计将有助于维持器官功能。预计该结果将应用于器官移植期间运输移植器官。另一方面，我们还开发了人造胆管，这是肝移植所必需的。我们通过溶解弹性蛋白和电动机来成功构建了管子。使用这项研究，可以开发在肝移植期间使用生物取代的人造胆管等。通过结合上述技术，可以预期可以构建肝脏适用的肝脏，并且可以实现肝脏已移植。

项目成果

期刊论文数量（7）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Development of miniature human liver with mouse decellularized liver

用小鼠脱细胞肝脏开发微型人类肝脏

DOI：
发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
0
作者：
Yukako Fukuda;Jaeyong Cho;Hiroki Sakamoto;Nana Shirakigawa;Takanobu Yamao;Tatsunori Miyata;Yo-ichi Yamashita;Hideo Baba;Hiroyuki Ijima
通讯作者：
Hiroyuki Ijima

Development of liver-specific ECM electrospun nanofiber as a potential substrate for primary hepatocytes

开发肝脏特异性 ECM 电纺纳米纤维作为原代肝细胞的潜在基质

DOI：
发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
0
作者：
Yukako Fukuda;Jaeyong Cho;Hiroki Sakamoto;Nana Shirakigawa;Takanobu Yamao;Tatsunori Miyata;Yo-ichi Yamashita;Hideo Baba;Hiroyuki Ijima;Kozue Yoshida，Mika Kondo，Shunsuke Nakamura，Hiroki Sakamoto，Nana Shirakigawa，Hiroyuki Ijima;Ronald Perocho Bual1,Haruna Kimura1,Yasuhiro Ikegami1,Nana Shirakigawa1,Hiroyuki Ijima1
通讯作者：
Ronald Perocho Bual1,Haruna Kimura1,Yasuhiro Ikegami1,Nana Shirakigawa1,Hiroyuki Ijima1

灌流型臓器保存システムの提案とその温度依存性の検討

灌注式器官保存系统的提出及其温度依赖性研究