TRECK法によるミクログリア除去モデルを用いた脱髄性疾患とてんかんの病態解明

使用 TRECK 方法的小胶质细胞去除模型阐明脱髓鞘疾病和癫痫的病理学

基本信息

批准号：
19K08311
负责人：
佐久間啓
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

CX3CR1-CreERT2マウスとDTR-KIマウスを交配して得られたマウス（Cx3CR1-iDTRマウス）にTamoxifenとジフテリア毒素（DT）を投与し、マウスから脳を摘出してミクログリアが除去されているかどうかを免疫組織化学法により確認したが、コントロールマウスと比べてミクログリアの数に変化は見られなかった。そのためtamoxifenの投与時期を変える、投与回数を増やす、投与間隔を変更する、DTの投与量を増やす等の様々な試みを行なったが、いずれも期待した変化は見られなかった。以上の結果から、マウスに予期せぬ遺伝学的変化が生じている可能性を考えた。まず、ミクログリアにCre-loxpシステムによる組換えが生じているかどうかを確認するためにTd-Tomatoを確認したが、傾向強度が弱く組換えの有無を評価することはできなかった。次にヒトDTRに対する抗体による評価も試みたが、ミクログリアにDTRの染色は認められなかった。そこでCX3CR1-iDTRマウスの脳より混合グリア培養を作製し、in vitroで4-OH-tanoxifenとDTを投与したが、やはりミクログリアの減少は認められなかった。これらの結果から、何らかの理由によりミクログリアにおいて目的の遺伝子組換えが起こっていないと結論した。

通过将他莫昔芬和dtr-ki小鼠配合获得的小鼠给小鼠（CX3CR1-IDTR小鼠）施用了他莫昔芬和二莫昔芬和二脑毒素毒素（DT），并从小鼠中除去脑部，以确认是否已通过免疫组织进行了更改，以确认Microglia是否已被清除，但没有任何更改。因此，进行了各种尝试，例如改变他莫昔芬的给药时间，增加了管理的数量，更改管理间隔和增加DT的剂量，但是没有观察到预期的变化。从上述结果中，我们考虑了小鼠可能发生意外遗传变化的可能性。首先，我们检查了TD-TOMATO，以检查小胶质细胞是否已与CRE-LoxP系统重组，但是趋势强度很弱，无法评估是否存在重组。接下来，我们还尝试使用抗体评估人DTR，但在小胶质细胞中未观察到DTR的染色。因此，从CX3CR1-IDTR小鼠的大脑中制备了混合的神经胶质培养物，并在体外施用了4-OH-Tananoxifen和DT，但观察到小胶质细胞的降低。这些结果得出的结论是，由于某种原因，在小胶质细胞中没有发生遗传重组。

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Early-life stress induces the development of Alzheimer's disease pathology via angiopathy

早期生活压力通过血管病变诱发阿尔茨海默病病理学的发展

DOI：
10.1016/j.expneurol.2020.113552
发表时间：
2021
期刊：
Experimental Neurology
影响因子：
5.3
作者：
Tanaka Tomoko;Hirai Shinobu;Hosokawa Masato;Saito Takashi;Sakuma Hiroshi;Saido Takaomi;Hasegawa Masato;Okado Haruo
通讯作者：
Okado Haruo

Elevated cytokine, chemokine, and growth and differentiation factor-15 levels in hemorrhagic shock and encephalopathy syndrome: A retrospective observational study

DOI：
10.1016/j.cyto.2020.155324
发表时间：
2021-01-01
期刊：
CYTOKINE
影响因子：
3.8
作者：
Yamaguchi，Hiroshi;Nishiyama，Masahiro;Nagase，Hiroaki
通讯作者：
Nagase，Hiroaki

Improvement in recurrent anti-myelin oligodendrocyte glycoprotein antibody - positive cerebral cortical encephalitis not requiring anti - inflammatory therapy following the decrease in cytokine/chemokine levels

细胞因子/趋化因子水平降低后，复发性抗髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白抗体阳性的大脑皮质脑炎的改善不需要抗炎治疗

DOI：
10.1016/j.msard.2020.102168
发表时间：
2020
期刊：
Multiple Sclerosis and Related Disorders
影响因子：
4
作者：
Takamatsu Tomoko;Yamanaka Gaku;Uryu Hideko;Takeshita Mika;Morishita Natsumi;Morichi Shinichiro;Ishida Yu;Oana Shingo;Terashi Hiroo;Shichino Hiroyuki;Sakuma Hiroshi;Kawashima Hisashi
通讯作者：
Kawashima Hisashi