ゲノム編集法に基づく生体内網羅的スクリーニング法の確立とT細胞生成機構の理解

基于基因组编辑方法建立体内综合筛选方法及了解T细胞生成机制

• 批准号: 19J00248
• 负责人: 室 龍之介
• 金额: $ 3.08万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-25 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J00248/
• 关键词: 胸腺; T細胞; 胸腺上皮細胞; sgRNA; CRISPR/Cas9; スクリーニング

これまでの成果から胸腺細胞の分化に関与しうる遺伝子群が同定された。本研究を進める過程で、遺伝子Xを胸腺上皮細胞特異的に欠損するマウス(X-cKOマウス)が作成された。X-cKOマウスは、胸腺の低形成や胸腺T細胞分化の障害を示したことから、その原因を究明する必要が生じた。よって、胸腺細胞の分化を支持する間質細胞に軸足をおいた研究も進めた。公共のデータベースおよび既報の遺伝子発現データを独自に解析した結果、遺伝子Xは胸腺上皮細胞の中でも胸腺髄質上皮細胞(mTEC)に高発現することが示された。そこで、X-cKOマウスのmTECを解析した結果、mTECの分化が顕著に障害されていた。mTECを精製し、Bulk-RNA sequence解析を行なったところ、遺伝子Xを欠損するmTECでは、数千の遺伝子が有意に発現低下したが、発現上昇する遺伝子はわずかであった。過去の報告からmTECは自己反応性T細胞の排除に重要であることが示されている。したがって、今後、X-cKOマウスにおける胸腺T細胞のレパトア変化や自己免疫疾患の発症について詳細に検証する必要がある。

根据迄今为止获得的结果，已经鉴定了一组可参与胸腺细胞分化的基因。在这项研究过程中，创建了胸腺上皮细胞中特异缺乏 X 基因的小鼠（X-cKO 小鼠）。 X-cKO 小鼠表现出胸腺发育不全和胸腺 T 细胞分化受损，促使我们调查其原因。因此，我们还将研究重点放在支持胸腺细胞分化的基质细胞上。对公共数据库和之前发表的基因表达数据的独立分析表明，X基因在胸腺上皮细胞中的胸腺髓质上皮细胞（mTEC）中高表达。因此，对 X-cKO 小鼠 mTEC 的分析表明，mTEC 分化显着受损。当纯化 mTEC 并进行批量 RNA 序列分析时，在缺乏 X 基因的 mTEC 中，数千个基因的表达显着降低，但只有少数基因上调。之前的报告表明，mTEC 在消除自身反应性 T 细胞方面发挥着重要作用。因此，今后有必要详细研究X-cKO小鼠胸腺T细胞库的变化以及自身免疫性疾病的发生情况。

项目成果

中枢性免疫寛容の成立におけるアルギニンメチル基転移酵素の意義

精氨酸甲基转移酶在中枢免疫耐受建立中的意义

• 发表时间: 2021
• 作者: 室 龍之介;新田 剛;高柳 広
• 通讯作者: 高柳 広

炎症性gdT細胞の分化における分子シグナル伝達

炎症 gdT 细胞分化中的分子信号传导

• 发表时间: 2019
• 作者: 室龍之介;新田剛;高柳広
• 通讯作者: 高柳広

Molecular mechanism of Syk-mediated TCR signal in gdT cells

Syk介导的gdT细胞TCR信号的分子机制

• 发表时间: 2019
• 作者: Ryunosuke Muro;Takeshi Nitta;Hiroshi Takayanagi
• 通讯作者: Hiroshi Takayanagi

アルギニンメチル化による中枢性免疫寛容の確立

通过精氨酸甲基化建立中枢免疫耐受

• 发表时间: 2021
• 作者: 室 龍之介;新田 剛;高柳 広
• 通讯作者: 高柳 広

炎症性gdT細胞の分化を誘導するTCRシグナルの解明

阐明诱导炎症性 gdT 细胞分化的 TCR 信号

• 发表时间: 2019
• 作者: 室龍之介;新田剛;高柳広
• 通讯作者: 高柳広