Discovery of the Prunus-specific self-incompatibility recognition system and its horticultural applications

李属特有的自交不亲和识别系统的发现及其园艺应用

基本信息

批准号：
19H00941
负责人：
田尾龍太郎
金额：
$ 28.87万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

（共通反応に関する仮説検証実験）昨年度に得られた結果の検証のため，異なるSハプロタイプ由来の組換えS-RNaseを用いた共免疫沈降実験を行ったところ，昨年度と同様にS-RNaseとMGSTの結合が確認されると同時にSFBとの結合も確認された．しかしながら，昨年度までの実験で検出されたDnaJ様タンパク質と同じタイプのDnaJ様タンパク質は検出されなかった．DnaJ様タンパク質は新たな共通因子候補であるため，この結果についてはさらに検証する必要がある．MGSTの立体構造をin silicoで検証したところ，チオレドキシン活性を持つ可能性が高いことを示唆する結果が得られた．（和合反応に関する仮説検証実験）S locus F-box likes（SLFLs）およびS haplotype-specific F box likes（SFBLs）によるS-RNaseのポリユビキチン化を様々な条件と実験手法により検討したが，現在までにS-RNaseのポリユビキチン化は見られていない．（不和合反応に関する仮説検証実験）昨年度に行った組み換えS-RNaseを用いたプルダウンアッセイで，雌ずい因子S-RNaseと花粉因子SFBの結合が初めて確認された．本年度，この検証のために異なるSハプロタイプの組み換えS-RNaseを用いた検証実験を行ったところ，昨年度と同様に自己特異的にS-RNaseとSFBが結合することが確認された．（組換え花粉を用いた証明実験）昨年度までの実験でデザインしたMGSTとSFBのアンチセンスオリゴを用いてin vitroおよびin vivoで両遺伝子のノックダウンにより不和合性反応の打破が認められたので，その結果を取り纏めて論文として発表した．

（关于公共反应的假设验证实验）为了验证去年获得的结果，同时使用了使用不同的S-RNase衍生的S-RNase进行的社区式实验。债券被确认。然而，未检测到类似DNAJ的蛋白，类型为DNAJ样蛋白。 DNAJ类蛋白是一种新的共同因子候选人，因此必须进一步验证该结果。验证MGST在硅中的三维结构表明，它表明它很可能具有硫氧还蛋白活性。（关于和谐反应的假设验证实验）S-RNase的多比基蛋白通过S-cocus f-box Likes（SLFL）和S单倍型特异性F盒喜欢（SFBLS）检查了各种条件和实验方法不是s-RNase的多比基蛋白。（关于恶作剧反应的假设检验）通过去年进行的重组S-RNase在下拉之旅中首次确认花粉因子S-RNase和花粉因子SFB的结合。在这个财政年度，使用不同的S-RNase S-RNase进行此验证的验证实验证实，S-RNase和SFB将与去年一样具有自我特定的结合。（使用重新组合花粉的证书实验）由于在体外和体内的双基因敲低使用MGST和SFB的抗sensensense Oligo，因此两种基因的敲低因破坏了不一致的反应总结并作为论文发表。