レクチン受容体シグナルの時間的伝播の違いが異なる樹状細胞応答を決定する分子機構

凝集素受体信号时间传播差异决定不同树突细胞反应的分子机制

基本信息

批准号：
20J10053
负责人：
渡邊美幸
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-24 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

アダプター分子（FcRγ）を共有する2種類のC型レクチン受容体（Dectin-2とMincle）が異なるプロファイルのサイトカイン産生を誘導する分子機構を、Dectin-2特異的なIL-2産生機構から明らかにすることを目的とし研究を進めてきた。これまでの検討より、IL-2産生には恒常的に発現しているDectin-2が伝達する刺激早期のFcRγシグナルが重要であることが分かった。Il2転写に至るまでの細胞内挙動を詳細に解析するためにRNA-seq及びATAC-seq解析を行ったところ、Dectin-2とMincleでは遺伝子発現及びクロマチン動態の経時的挙動が異なることが分かった。特にIl2 locusの上流には刺激早期のDectin-2-FcRγシグナルでのみクロマチンが開く領域が存在したため、その領域を欠失するマウスを樹立したところIL-2産生が低下した。加えて、FcRγ直下のシグナル分子Sykの挙動をビオチンリガーゼによる近接依存性標識法（TurboID）にて評価したところ、2つの受容体間ではSykの構造変化の挙動が異なり、特にDectin-2下流では活性化formへの構造変化が推察された。したがって、FcRγは会合する受容体固有のkineticsでシグナルを伝達することで、下流のシグナル伝達・クロマチン動態を変化させることができた結果、異なる遺伝子発現を誘導することが明らかとなった。

进行了研究的目的是阐明分子机制，其中共享适配器分子（FCRγ）的两个C型凝集素受体（Dectin-2和Mincle）诱导细胞因子的产生，目的是阐明来自Etectin-2-Specific IL-2生产机制的分子机制。先前的研究表明，由组成型表达的Dectin-2传输的早期刺激FCRγ信号对于IL-2产生很重要。为了分析导致IL2转录详细转录的细胞内行为，进行了RNA-SEQ和ATAC-SEQ分析，并发现Dectin-2和Mincle之间的基因表达和染色质动力学的行为不同。特别是，在IL2基因座的上游有一个区域，其中仅通过早期刺激Dectin-2-FCRγ信号打开染色质，因此当建立删除该区域的小鼠时，IL-2产生减少。此外，当使用生物素连接酶使用接近性依赖性标记（涡轮）评估信号分子SYK的行为直接在FCRγ下进行评估时，SYK结构变化的行为在两个受体之间有所不同，尤其是可以推断出对激活形式的结构变化，尤其是在dectin-2的下游。因此，揭示了FCRγ可以通过通过相关受体特异性动力学传输信号来改变下游信号传导和染色质动力学，并且它诱导了不同的基因表达。