C型レクチン受容体の乳酸菌認識と腸管T細胞分化への影響の解析

C型凝集素受体对乳酸菌识别及肠道T细胞分化的影响分析

• 批准号: 22K05475
• 负责人: 島津 朋之
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Miyagi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K05475/
• 关键词: CLR; 乳酸菌; SLP

近年増加するアレルギー疾患など、免疫が関わる疾病でのT細胞の役割は大きい。そのため、食からT細胞応答を調節できれば様々な疾病の予防・治療に大きく貢献できる。これまで乳酸菌の免疫応答の起点となる自然免疫受容体の中で、宿主に存在するC型レクチン受容体(CLR)ファミリー分子が免疫機能に影響を及ぼすことを認めている。しかし、CLRと乳酸菌の関係性はこれまでほとんど着目されておらず、不明な点が多い。本提案では、CLRと乳酸菌との関わりを幅広く分子レベルで明らかにし、そしてCLR反応性乳酸菌が腸管T細胞分化へ与える影響について検討することを目的とした。本年度は、CLRの一種Mincleと乳酸菌との関係性について知見を深め、そして新たなCLR受容体との反応性について探索を行った。熱殺菌した乳酸菌L. brevis がMincleと反応することを報告している。これまでの結果から表層タンパク質(SLP)の関与が考えられたため、L. brevis La37株からSLPを抽出し、検討を行った。その結果、SLPがMincleのリガンドであることが明らかとなった。また、Mincle刺激性はSLPが遊離したような状態では刺激性が弱いこと、そして抽出SLPには糖が存在することを明らかにした。現在、SLPについての詳細を検討している。ところで、多様な乳酸菌がSLPを持つことが知られている。そこで、SLPの有無を元に様々な乳酸菌(計9菌種)について検討したところ、SLPを持つ乳酸菌のSLP全てがMincle反応性を示した。これらについても詳細を検討中である。一方で新たなCLR受容体との結合を検討するため、計12種類のCLR-Fcを作成し検討を行った。いくつか結合が認められたため、レポーター細胞を作成しその結合性について検討を行っている。

T细胞在涉及免疫系统的疾病中发挥着重要作用，例如近年来不断增加的过敏性疾病。因此，如果我们能够通过食物调节T细胞反应，就可以为各种疾病的预防和治疗做出巨大贡献。在作为乳酸菌免疫反应起点的先天免疫受体中，人们已经认识到宿主体内存在的C型凝集素受体（CLR）家族分子影响免疫功能。然而，迄今为止，CLR与乳酸菌之间的关系很少受到关注，许多问题仍不清楚。该提案的目的是在分子水平上广泛阐明CLR与乳酸菌之间的关系，并研究CLR反应性乳酸菌对肠道T细胞分化的影响。今年，我们加深了对Mincle（一种CLR）与乳酸菌之间关系的了解，并探讨了它与新的CLR受体的反应性。据报道，热灭菌的乳酸菌短乳杆菌会与 Mincle 发生反应。根据之前的结果，认为涉及表面层蛋白(SLP)，因此从短乳杆菌La37菌株中提取SLP并进行研究。结果表明，SLP是Mincle的配体。我们还发现，当 SLP 游离时，Mincle 刺激较弱，并且提取的 SLP 中存在糖。我们目前正在考虑 SLP 的细节。顺便说一下，已知多种乳酸菌都具有SLP。因此，当我们根据是否存在SLP来研究各种乳酸菌（总共9种细菌）时，所有具有SLP的乳酸菌都表现出Mincle反应性。这些问题的细节也在考虑之中。另一方面，为了检查与新的CLR受体的结合，总共创建并检查了12种CLR-Fc。由于观察到了一些结合，因此创建了报告细胞并研究了结合特性。