腸内スタフィロコッカス属のスーパー抗原網羅的解析による気管支喘息発症要因の解明

肠道葡萄球菌超抗原综合分析阐明支气管哮喘发病因素

基本信息

批准号：
20J00029
负责人：
伊藤崇
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-24 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20J00029/
关键词：
気管支喘息

项目摘要

3年目の本期間には申請書に記載した【研究計画3】スーパー抗原の網羅的解析によるHDM（House dust mite、チリダニ）誘発性アレルギー性気道炎症に寄与する腸内Staphylococcus 属内リガンドの探索および腸管細胞への寄与の検討を一部変更し、行った。前回スーパー抗原の１種であるStaphylococcal enterotoxin B(SEB)がS. aureus投与マウス糞便において上昇していることが明らかとなっており、SEBは樹状細胞に働きかけることが報告されていることから、まずはPBS投与群およびS. aureus投与群の樹状細胞の細胞数の評価を行った。その結果、S. aureus投与によって腸管樹状細胞の数に減少傾向が見られた。以上の結果から、S. aureusがTh2細胞およびTh2サイトカインに寄与するメカニズムとして樹状細胞が関与する可能性が示唆された。次にS. aureusが樹状細胞の活性化に及ぼす影響について調べるため、S. aureusと腸管粘膜固有層内樹状細胞をin virto 条件下にて共培養し、細胞表面分子の発現について評価を行った。マウス腸管粘膜固有層内樹状細胞をCD8α+DCと、CD172a+DC の2つのサブセットについて、FACSソーティングを行った。その後それぞれのサブセット別にS. aureusの生菌あるいは死菌とともに培養を行った。その結果、樹状細胞上の共刺激分子であるCD40、CD80、CD86の発現はCD8α+DC樹状細胞とCD172a+樹状細胞のどちらにおいても、生菌・死菌に関わらず、S. aureus存在下および非存在下で差は見られなかった。以上の結果から、S. aureusは樹状細胞の数には寄与するものの、表面分子の発現に影響を与えず樹状細胞の活性化抑制には関与しない可能性が考えられた。

第三年这个时期，我们将进行申请中所述的【研究计划3】：通过综合分析，寻找肠道内葡萄球菌属内导致HDM（屋尘螨）引起的过敏性气道炎症的配体以及对肠细胞的贡献，但有一些修改。此前，有报道称，金黄色葡萄球菌处理的小鼠粪便中的一种超抗原——葡萄球菌肠毒素 B (SEB) 升高，据报道 SEB 作用于树突状细胞。 PBS施用组和金黄色葡萄球菌施用组中的细胞。其结果是，给予金黄色葡萄球菌后，肠内树突状细胞的数量有减少的倾向。这些结果表明，树突状细胞可能参与金黄色葡萄球菌生成 Th2 细胞和 Th2 细胞因子的机制。接下来，为了研究金黄色葡萄球菌对树突状细胞活化的影响，我们在体外条件下共培养金黄色葡萄球菌和肠固有层树突状细胞，并评估细胞表面分子的表达。对小鼠肠固有层树突状细胞的两个子集进行 FACS 分选：CD8α+DC 和 CD172a+DC。然后将每个子集与活的或死的金黄色葡萄球菌一起培养。结果，在金黄色葡萄球菌存在的情况下，无论是活细菌还是死细菌，CD8α+ DC 树突细胞和 CD172a+ 树突细胞中树突细胞上的共刺激分子 CD40、CD80 和 CD86 的表达均增加。存在和不存在之间没有观察到差异。由以上结果可知，金黄色葡萄球菌虽然对树突状细胞的数量有贡献，但不影响表面分子的表达，不参与抑制树突状细胞的活化。