小胞体からの巨大分子分泌と外界シグナルによる分泌制御機構の解明

阐明内质网大分子的分泌和外部信号的分泌控制机制

基本信息

批准号：
20H03203
负责人：
齋藤康太
金额：
$ 11.4万
依托单位：
Akita University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H03203/
关键词：
分泌 TANGO1 Sec16 ER exit site

项目摘要

小胞体で合成された分泌タンパク質は小胞体上の特殊な領域であるER exit siteより出芽し、ゴルジ体を経由して細胞外へと輸送される。この過程は細胞内外の環境によって厳密に制御されている。小胞体上の分泌の出発点であるER exit siteも、環境に応じて、その数や大きさを変化させることで分泌調節を担うがそのメカニズムについては不明な点が多い。研究代表者は、これまでコラーゲンの積み荷受容体として同定したTANGO1がER exit siteの足場タンパク質Sec16と協調してER exit siteの形成を担うことを見出した。さらに細胞分裂期にTANGO1がリン酸化されることによってSec16との結合が減弱し、結果としてER exit siteの崩壊をきたすことを明らかにした。一方で、Sec16側のリン酸化による制御メカニズムは不明である。本年度、研究代表者は、昨年度Sec16の結合因子としてマススペクトロメトリーによって同定された因子のなかから、チロシン脱リン酸化酵素に着目した。本酵素の基質結合変異体と種々のCOPIIタンパク質との結合を検討したところ、Sec16が有意に脱リン酸化酵素と結合することを明らかにした。また同様の手法を用いて、Sec16のチロシンリン酸化部位を限定した。さらにチロシンキナーゼライブラリーを用いて、Sec16のリン酸化状態を検証した。その結果、いくつかのチロシンリン酸化酵素が有意にSec16のチロシンリン酸化を亢進した。今後は、どのような細胞環境においてSec16のチロシンリン酸化が制御されているか検証する。

在囊泡中合成的分泌蛋白是从ER出口部位（恩托斯的特殊区域）发芽的，并通过戈尔吉（Gorgi）在细胞外运输。该过程严格由内部和外部细胞外控制。 ER出口站点是胚胎分泌的起点，还负责通过根据环境改变数量和大小来调节分泌物，但是有许多未知的机制。研究代表发现，已被确定为胶原蛋白负荷体的Tango1负责与ER出口站点的脚手架蛋白SEC16合作形成ER出口位点。此外，揭示了在细胞分裂期间通过磷降低了SEC16的键，从而导致ER出口位点的崩溃。另一方面，SEC16侧磷酸化引起的控制机制尚不清楚。在这个财政年度，研究代表将去年从质谱法确定为SEC16的结合因子的因素上以酪氨酸去除酶为例。考虑到该酶的底物结合变体之间的结合与各种COPII蛋白之间的结合，发现SEC16与Dosite酶显着结合。使用类似的方法，Sec16的酪氨酸氧化酪氨酸位点受到限制。此外，使用酪氨酸激酶文库验证了SEC16的磷酸化状态。结果，一些酪氨酸氧化酶显着增强了SEC16酪氨酸氧化。将来，我们将验证SEC16酪氨酸氧化的哪些细胞环境受到控制。

项目成果

期刊论文数量（10）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Sec16のリン酸化による小胞体出芽部位ERESの形成制御機構

Sec16 磷酸化调节内质网出芽位点 ERES 的形成

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
前田深春;小松幸恵;齋藤康太
通讯作者：
齋藤康太

Mitotic ER exit site dynamics: insights into blockade of secretion from the ER during mitosis

有丝分裂 ER 出口位点动态：有丝分裂期间 ER 分泌阻断的见解

DOI：
10.1080/23723556.2020.1832420
发表时间：
2020
期刊：
Molecular & Cellular Oncology
影响因子：
2.1
作者：
Maeda Miharu;Komatsu Yukie;Saito Kota
通讯作者：
Saito Kota

Cargo receptor Surf4 regulates endoplasmic reticulum export of proinsulin in pancreatic β-cells.

DOI：
10.1038/s42003-022-03417-6
发表时间：
2022-05-13
期刊：
COMMUNICATIONS BIOLOGY
影响因子：
5.9
作者：
Saegusa, Keiko;Matsunaga, Kohichi;Maeda, Miharu;Saito, Kota;Izumi, Tetsuro;Sato, Ken
通讯作者：
Sato, Ken

細胞分裂期における分泌停止メカニズムの解明

阐明细胞分裂过程中分泌停滞的机制