Development of therapeutic strategies for the realization of tumor suppressive microRNA replacement therapy for refractory solid tumors

开发治疗策略以实现难治性实体瘤的抑癌性microRNA替代疗法

基本信息

批准号：
21H02992
负责人：
谷口高平
金额：
$ 11.15万
依托单位：
Osaka Medical and Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02992/
关键词：
microRNA 核酸医薬ドラッグデリバリーシステム切除不能 miRNA 創薬化学修飾

项目摘要

本年度は、大腸癌骨盤内再発モデルに対して、化学修飾型miRNA-143をリポフェクションで全身投与（尾静脈投与）する動物実験を中心に進めた。結果として、化学修飾型miRNA投与群で、有意な抗腫瘍効果を認めた。投与後の解析では、腫瘍中のmiRNA-143発現の上昇を認め、組織切片では腫瘍内および辺縁にmiRNA-143の集積を認めた。このことから抗腫瘍効果はmiRNAの投与により生じたということが示唆された。さらに抗腫瘍効果の機序を明らかにするため、miRNA投与後の腫瘍切片を用いてプロテオーム解析を実施し、標的遺伝子Xを同定した。miRNA-143とXの関係性および、Xの機能について詳細な検討を進める計画である。一方、細胞内還元環境を利用した新たなDDS開発については、ゲル粒子キャリアとプロドラッグ型miRNAの作製を進めた。ゲル粒子キャリアは、予備検討が進み、次年度には細胞導入実験を実施できる状況に至っている。既に導入に使用するmiRNAも選定しており、一部の実験を開始している。プロドラッグ型miRNAの作製に関しては、これまで、鋭敏な抗腫瘍効果は認めることを明らかにしているものの、化学修飾型miRNAの作製に苦戦しているmiRNA-145に照準を絞った。本年度は、化学修飾を付加する位置を決定するために2'-O-メチルを用いた修飾位置の最適化の検討等を実施し、適切な修飾付加の位置が決定しつつある。

今年，我们重点关注动物实验，其中通过脂转染（尾静脉给药）将化学修饰的 miRNA-143 全身给药至结直肠癌盆腔复发模型。结果，在化学修饰的miRNA施用组中观察到显着的抗肿瘤效果。给药后分析显示肿瘤中 miRNA-143 的表达增加，组织切片显示 miRNA-143 在肿瘤内及其边缘积聚。这表明抗肿瘤作用是由 miRNA 给药引起的。此外，为了阐明抗肿瘤作用的机制，我们使用miRNA施用后的肿瘤切片进行蛋白质组分析，并鉴定了靶基因X。我们计划对miRNA-143与X的关系以及X的功能进行详细的研究。另一方面，关于利用细胞内还原环境的新型DDS的开发，我们继续生产凝胶颗粒载体和前药型miRNA。凝胶颗粒载体的初步研究正在进行中，明年我们可以进行细胞导入实验。我们已经选择了用于导入的miRNA，并开始了一些实验。关于前药miRNA的生产，我们重点关注miRNA-145，它已被证明具有很强的抗肿瘤作用，但生产化学修饰的miRNA一直很困难。今年，为了确定添加化学修饰的位置，我们进行了使用2'-O-甲基优化修饰位置的研究，正在确定添加修饰的合适位置。