妊娠初期における超早産バイオマーカー探索:エクソソーム中胎盤特異的miRNA

妊娠早期极早产生物标志物的探索：外泌体中胎盘特异性 miRNA

基本信息

批准号：
19K18650
负责人：
高橋宏典
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

妊娠初期における妊婦の血液検体を用い、以下の知見を得た。１．後に妊娠糖尿病を発症した5症例と正常妊娠経過（コントロール）5症例の患者血清を用い、サイトカインアレイ(60種類）を施行した。結果、両群間に発現差(2倍以上）のあるサイトカインはCXCL５(妊娠糖尿病高値）、IGFBP-2（妊娠糖尿病高値）および、Leptin（妊娠糖尿病低値）であった。２．後に妊娠糖尿病を発症した5症例と正常妊娠経過（コントロール）5症例の患者血清を用い、グロースファクターアレイ(41種類）を施行した。結果、両群間に発現差(2倍以上）のあるグロースファクターは1つも認められなかった。３．Leptinは多数の先行論文がみられたことから、CXCL５とIGFBP-2に焦点を当て、１で用いた患者と別検体を用い、ELISAを施行した。ELISAにおいてはサイトカインアレイとは逆の結果、つまり、両分子ともコントロールの方が妊娠糖尿病罹患妊婦に比し、発現が高値であった。４．妊娠初期、妊娠中期、妊娠末期の妊婦血漿より超遠心法を用い、エクソソームを回収した。特異的抗体（CD64、CD9、Flotilin、TSG101、ApoA)を用いて、検証した。従来マーカーになるといわれていたCD64の発現はみられず、CD9、Flotilin、TSG101の発現はみられた。最近、Cell誌(Hoshino A et al., 2020)にこの結果と同一の結果を示すものが報告されており、血漿中のエクソソームの特徴を明らかにした。５．妊娠初期検体を継続して採取し、合計で1200検体を超えた。この中の検体で後に妊娠高血圧症候群、早産、妊娠糖尿病と発症した患者がそれぞれ20例以上集積できた。、

在怀孕初期，使用孕妇的血液标本获得以下发现。 1。使用五名患者的血清进行细胞因子阵列（60种类型），这些患者后来患有妊娠糖尿病和五名具有正常妊娠史的患者（对照）。结果，两组之间具有差异表达（超过2次）的细胞因子是CXCL5（妊娠糖尿病高），IGFBP-2（高妊娠糖尿病）和瘦素（低妊娠糖尿病）。 2。使用五名患者的血清进行生长因子阵列（41种类型），这些血清后来患有妊娠糖尿病和五名具有正常妊娠史的患者（对照）。结果，两组之间未观察到具有差异表达的生长因子（超过2次）。 3。由于瘦素已经看到了许多先前的论文，因此使用了与1中使用的标本相对于CXCL5和IGFBP-2进行的不同标本进行了ELISA。在ELISA中，结果与细胞因子阵列相反，也就是说，这两个分子的表达都比妊娠糖尿病的孕妇高。 4。在怀孕的早期，中和结束时，使用超速离心从孕妇的血浆中收集外泌体。使用特定抗体（CD64，CD9，Flotilin，TSG101，APOA）进行测试。 CD64的表达（以前据说是标记物）未观察到，并且观察到CD9，Flotilin和TSG101的表达。最近，细胞杂志（Hoshino A等，2020）显示出与该结果相同的结果，从而揭示了血浆中外泌体的特征。 5。连续收集早期妊娠样本，总共超过1200个样本。这些标本允许20多名患者，后来患有前启示性，早产和妊娠糖尿病。，，，，