代謝関連アミノ酸の多次元キラルHPLC法構築と精神・神経疾患の早期診断法開発

代谢相关氨基酸多维手性HPLC方法构建及精神神经疾病早期诊断方法开发

• 批准号: 19K16343
• 负责人: 古賀 鈴依子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Fukuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K16343/
• 关键词: キラルアミノ酸; 多次元HPLC分析; 代謝関連アミノ酸; 光学分割; 分析化学; 多次元HPLC

生体内におけるDAOの活性評価による精神・神経疾患の早期かつ客観的な診断指標を探索するため、2022年度は更なる分析対象アミノ酸の拡充を行った。昨年度までに分析法の構築および健常人の尿試料分析への適用・含量解析を達成した尿素回路関連アミノ酸であるシトルリンおよびオルニチン、リジン代謝物であるピペコリン酸および2-アミノアジピン酸に加え、新たにチロシン異性体であるo-チロシン、m-チロシンおよびp-チロシン、アミノ酪酸構造異性体であるα-アミノ酪酸およびβ-アミノ酪酸を分析対象として選定した。新たに選定したこれらのアミノ酸について、逆相分配、陰イオン交換および光学分割を組み合わせた三次元HPLC分析システムを構築し、尿試料分析へ適用した。その結果、夾雑成分の影響を受けることなく分析対象キラルアミノ酸の検出・定量が可能であり、健常人の尿試料中にp-チロシン、α-アミノ酪酸およびβ-アミノ酪酸鏡像異性体が存在することを明らかにした。p-チロシンおよびα-アミノ酪酸の%D値（(D/(D+L)x100）がそれぞれ約0.2%、約0.02%であったのに対し、β-アミノ酪酸の%D値は約60%と非常に高い値を示した。また、血漿試料分析を行った結果リジン、ピペコリン酸、α-アミノ酪酸およびβ-アミノ酪酸のD体が検出され、尿中において高い%D値を示したピペコリン酸およびβ-アミノ酪酸については血漿中においてもそれぞれ約20%、約50%と高い値を示すことが明らかとなった。

在2022年，我们进一步扩展了氨基酸以进行分析，以探讨通过体内DAO的活性来探索精神和神经系统疾病的早期和客观诊断指标。 In addition to urea circuit-related amino acids, citrulline and ornithine, which have achieved the construction of analytical methods and application and content analysis of urine samples in healthy individuals by last year, pipecolic acid and 2-aminoadipic acid, lysine metabolites, o-tyrosine, m-tyrosine and p-tyrosine, and aminobutyric acid structural isomers, α-aminobutyric选择酸和β-氨基丁酸进行分析。对于这些新选择的氨基酸，构建了一个三维HPLC分析系统，该系统结合了反向相分配，阴离子交换和光学分辨率，并应用于尿液样品分析。结果，可以检测和量化手性氨基酸，而不受污染成分影响的手性氨基酸，并且发现P-酪氨酸，α-氨基丁酸和β-氨基丁酸酸映体在尿液中存在于健康的人中。 p-酪氨酸和α-氨基丁酸的％d值（（D/（D/（D+L）X100）分别为0.2％和约0.02％，而β-氨基丁酸的％D值非常高，在60％时，质量分析表明，lysical酸，pipecececoric，pipecececececoric，pipececececoric，pipececececoricα，在血浆中，β-氨基丁酸在尿液中表现出很高的％D值，分别约为20％和约50％。

项目成果

シトルリン及びオルニチンを対象とする三次元キラルHPLC分析法の開発とD-アミノ酸酸化酵素欠損に伴う尿中含量変化解析

瓜氨酸和鸟氨酸三维手性HPLC分析方法的建立及D-氨基酸氧化酶缺乏症尿含量变化分析

• 发表时间: 2019
• 作者: 古賀鈴依子;坂口洋平;三田真史;吉田秀幸;能田 均;浜瀬健司
• 通讯作者: 浜瀬健司

アミノ酪酸構造異性体を対象とする高選択的多次元キラル HPLC 分析法の開発

氨基丁酸结构异构体高选择性多维手性HPLC分析方法的建立

• 发表时间: 2022
• 作者: 上田潔奈;古賀鈴依子;川末慎葉;坂口洋平;三田真史;井手友美;吉田秀幸;能田 均;浜瀬健司
• 通讯作者: 浜瀬健司

二次元キラルHPLCを用いるカルノシンの高選択的分析法の開発

使用二维手性 HPLC 开发肌肽高选择性分析方法

• 发表时间: 2021
• 作者: Reiko KOGA;Nao KIMURA;Yoshiki SUMI;Yohei SAKAGUCHI;Masashi MITA;Tomomi IDE;Kenji HAMASE;Hideyuki YOSHIDA;Hitoshi NOHTA;守田羽吟，川末慎葉，古賀鈴依子，坂口洋平，三田真史，濱瀬健司，吉田秀幸，能田 均
• 通讯作者: 守田羽吟，川末慎葉，古賀鈴依子，坂口洋平，三田真史，濱瀬健司，吉田秀幸，能田 均

フルオラスキラル誘導体化LC-MS法による高選択的アミノ酸分析

使用氟手性衍生化 LC-MS 方法进行高选择性氨基酸分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 宮里ちひろ;中武樹;川末慎葉;古賀鈴依子;秋田健行;浜瀬健司;吉田秀幸;能田 均
• 通讯作者: 能田 均

Development of a three-dimensional HPLC system for the enantioselective determination of urea-cycle amino acids in mammalian urine

开发用于对映选择性测定哺乳动物尿液中尿素循环氨基酸的三维 HPLC 系统

• 发表时间: 2019
• 作者: Reiko KOGA;Yohei SAKAGUCHI;Masashi MITA;Tomomi IDE;Hideyuki YOSHIDA;Hitoshi NOHTA;Kenji HAMASE
• 通讯作者: Kenji HAMASE