代謝関連アミノ酸の多次元キラルHPLC法構築と精神・神経疾患の早期診断法開発

代谢相关氨基酸多维手性HPLC方法构建及精神神经疾病早期诊断方法开发

• 批准号: 19K16343
• 负责人: 古賀 鈴依子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Fukuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K16343/
• 关键词: キラルアミノ酸; 多次元HPLC分析; 代謝関連アミノ酸; 光学分割; 分析化学; 多次元HPLC

生体内におけるDAOの活性評価による精神・神経疾患の早期かつ客観的な診断指標を探索するため、2022年度は更なる分析対象アミノ酸の拡充を行った。昨年度までに分析法の構築および健常人の尿試料分析への適用・含量解析を達成した尿素回路関連アミノ酸であるシトルリンおよびオルニチン、リジン代謝物であるピペコリン酸および2-アミノアジピン酸に加え、新たにチロシン異性体であるo-チロシン、m-チロシンおよびp-チロシン、アミノ酪酸構造異性体であるα-アミノ酪酸およびβ-アミノ酪酸を分析対象として選定した。新たに選定したこれらのアミノ酸について、逆相分配、陰イオン交換および光学分割を組み合わせた三次元HPLC分析システムを構築し、尿試料分析へ適用した。その結果、夾雑成分の影響を受けることなく分析対象キラルアミノ酸の検出・定量が可能であり、健常人の尿試料中にp-チロシン、α-アミノ酪酸およびβ-アミノ酪酸鏡像異性体が存在することを明らかにした。p-チロシンおよびα-アミノ酪酸の%D値（(D/(D+L)x100）がそれぞれ約0.2%、約0.02%であったのに対し、β-アミノ酪酸の%D値は約60%と非常に高い値を示した。また、血漿試料分析を行った結果リジン、ピペコリン酸、α-アミノ酪酸およびβ-アミノ酪酸のD体が検出され、尿中において高い%D値を示したピペコリン酸およびβ-アミノ酪酸については血漿中においてもそれぞれ約20%、約50%と高い値を示すことが明らかとなった。

为了通过评估 DAO 体内活性来寻找精神和神经疾病的早期客观诊断指标，我们进一步扩大了 2022 财年要分析的氨基酸范围。除了与尿素循环相关的氨基酸瓜氨酸和鸟氨酸，以及赖氨酸代谢物哌可酸和2-氨基己二酸之外，我们还开发了分析方法，将其应用于健康人的尿液样本分析，并分析了它们的含量，我们新增了酪氨酸异构体邻酪氨酸、间酪氨酸和对酪氨酸，并选择了氨基丁酸结构异构体α-氨基丁酸和β-氨基丁酸进行分析。针对这些新筛选的氨基酸，我们构建了结合反相分配、阴离子交换和光学分辨率的三维高效液相色谱分析系统，并将其应用于尿液样本分析。结果，可以检测和定量待分析的手性氨基酸，而不受污染物成分的影响，并且健康人的尿液样本中存在对酪氨酸、α-氨基丁酸和β-氨基丁酸对映体。 。对酪氨酸和α-氨基丁酸的%D值((D/(D+L)x100)分别约为0.2%和0.02%，而β-氨基丁酸的%D值约为60。此外，血浆样品分析表明赖氨酸和检测到了哌可酸、α-氨基丁酸和β-氨基丁酸的D形式，尿液中表现出较高%D值的哌可酸和β-氨基丁酸也分别占约20%和50% ，结果显示在血浆中显示出高值。

项目成果

シトルリン及びオルニチンを対象とする三次元キラルHPLC分析法の開発とD-アミノ酸酸化酵素欠損に伴う尿中含量変化解析

瓜氨酸和鸟氨酸三维手性HPLC分析方法的建立及D-氨基酸氧化酶缺乏症尿含量变化分析

• 发表时间: 2019
• 作者: 古賀鈴依子;坂口洋平;三田真史;吉田秀幸;能田 均;浜瀬健司
• 通讯作者: 浜瀬健司

アミノ酪酸構造異性体を対象とする高選択的多次元キラル HPLC 分析法の開発

氨基丁酸结构异构体高选择性多维手性HPLC分析方法的建立

• 发表时间: 2022
• 作者: 上田潔奈;古賀鈴依子;川末慎葉;坂口洋平;三田真史;井手友美;吉田秀幸;能田 均;浜瀬健司
• 通讯作者: 浜瀬健司

フルオラスキラル誘導体化LC-MS法による高選択的アミノ酸分析

使用氟手性衍生化 LC-MS 方法进行高选择性氨基酸分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 宮里ちひろ;中武樹;川末慎葉;古賀鈴依子;秋田健行;浜瀬健司;吉田秀幸;能田 均
• 通讯作者: 能田 均

二次元キラルHPLCを用いるカルノシンの高選択的分析法の開発

使用二维手性 HPLC 开发肌肽高选择性分析方法

• 发表时间: 2021
• 作者: Reiko KOGA;Nao KIMURA;Yoshiki SUMI;Yohei SAKAGUCHI;Masashi MITA;Tomomi IDE;Kenji HAMASE;Hideyuki YOSHIDA;Hitoshi NOHTA;守田羽吟，川末慎葉，古賀鈴依子，坂口洋平，三田真史，濱瀬健司，吉田秀幸，能田 均
• 通讯作者: 守田羽吟，川末慎葉，古賀鈴依子，坂口洋平，三田真史，濱瀬健司，吉田秀幸，能田 均

Development of a three-dimensional HPLC system for the enantioselective determination of urea-cycle amino acids in mammalian urine

开发用于对映选择性测定哺乳动物尿液中尿素循环氨基酸的三维 HPLC 系统

• 发表时间: 2019
• 作者: Reiko KOGA;Yohei SAKAGUCHI;Masashi MITA;Tomomi IDE;Hideyuki YOSHIDA;Hitoshi NOHTA;Kenji HAMASE
• 通讯作者: Kenji HAMASE