HPV関連中咽頭癌におけるDNA損傷修復系と内因性免疫因子APOBEC3の発現

DNA损伤修复系统和内源性免疫因子APOBEC3在HPV相关口咽癌中的表达

基本信息

批准号：
20K18299
负责人：
甲能武幸
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Keio University (2021-2022)独立行政法人国立病院機構(東京医療センター臨床研究センター) (2020)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18299/
关键词：
HPV 頭頸部癌 DNA損傷修復系 APOBEC 阻害実験中咽頭癌化学療法予後予測因子 shRNA

项目摘要

HPV陽性頭頸部癌に対し、DNA損傷修復系因子およびAPOBEC因子が新規治療の標的となりうるか、in vitroでの解析を行った。具体的には、様々なDNA損傷修復経路のうちDNA2本鎖損傷を修復するATM経路、1本鎖損傷や複製フォークの停止を修復するATR経路、DNA2本鎖架橋を修復するFA経路に着目し、HPV陽性頭頸部癌細胞株であるUPCI090細胞と、コントロールとしてHPV陰性頭頸部癌細胞株であるSCC9細胞、SCC25細胞を用いて阻害実験を行った。阻害にはKU55933(ATM 阻害剤)とVE822(ATR 阻害剤)を用いたが、FA経路とAPOBEC因子の特異的阻害薬は今のところ存在しないので、RNA干渉によりノックダウン細胞を作成し検討した。その結果、HPV陽性頭頸部癌細胞株においては、シスプラチン単剤投与と比べ、DNA損傷修復経路阻害＋シスプラチン投与で著明に抗腫瘍効果を認めた。なかでも、ATR阻害剤併用投与群で最も顕著に殺細胞効果を認めた。APOBEC３Bのノックダウン細胞におけるシスプラチンの抗腫瘍効果はWild typeと比較してわずかに増大していたが、統計学的な有意な差は認めず、APOBEC因子阻害での抗腫瘍効果の上乗せは軽度であった。一方、HPV陰性頭頸部癌細胞株においてはDNA損傷修復経路阻害の抗腫瘍上乗せ効果は軽度であった。HPV増殖や腫瘍化への関与が示唆されるDNA損傷修復系因子の阻害はHPV陽性頭頸部癌においてより効果を発揮し、ATR阻害剤併用によって殺細胞性のシスプラチンを低用量で投与する新たな治療戦略への寄与が考察された。

我们进行了一项体外分析，以确定 DNA 损伤修复系统因子和 APOBEC 因子是否可以作为 HPV 阳性头颈癌的新治疗靶点。具体而言，我们重点研究了各种 DNA 损伤修复中的 ATM 途径（修复 DNA 双链损伤）、ATR 途径（修复单链损伤和复制叉停滞）以及 FA 途径（修复 DNA 双链交联）使用 UPCI090 细胞（HPV 阳性头颈癌细胞系）和 SCC9 和 SCC25 细胞（HPV 阴性头颈癌细胞系）进行抑制实验。我们使用KU55933（ATM抑制剂）和VE822（ATR抑制剂）进行抑制，但由于目前没有针对FA途径和APOBEC因子的特异性抑制剂，因此我们通过RNA干扰创建了敲低细胞并进行了研究。结果，在 HPV 阳性头颈癌细胞系中，与单独施用顺铂相比，DNA 损伤修复途径抑制加顺铂施用观察到显着的抗肿瘤效果。其中，ATR抑制剂组合给药组观察到最显着的细胞杀伤效果。与野生型相比，顺铂在APOBEC3B敲低细胞中的抗肿瘤作用略有增强，但没有观察到统计学上的显着差异，并且APOBEC因子抑制的抗肿瘤作用也很轻微。另一方面，在HPV阴性头颈癌细胞系中，DNA损伤修复途径抑制的抗肿瘤作用较弱。抑制 DNA 损伤修复系统因子（被认为与 HPV 增殖和肿瘤发生有关）对 HPV 阳性头颈癌更有效。讨论了对治疗策略的贡献。

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Molecular prognostic indicators in HPV-positive oropharyngeal cancer: an updated review

HPV 阳性口咽癌的分子预后指标：最新综述

DOI：
10.1007/s10585-022-10148-9
发表时间：
2022-01-27
期刊：
Clinical & Experimental Metastasis
影响因子：
4
作者：
G. Mor;A. Diaconescu;I. Ibrahim;Genevieve Lamarche;J. S. Ruas;Jacqueline Dalfen;M. Hier;M. Alaoui;M. Maschietto;S. D. da Silva
通讯作者：
S. D. da Silva

Genomic Instability and DNA Damage Repair Pathways Induced by Humn Papillomaviruses.

人乳头瘤病毒诱导的基因组不稳定性和 DNA 损伤修复途径。