Development of therapeutic drugs fro achondroplasia-Examination of FGFR3 inhibitory effects of meclizine hydrochloride

软骨发育不全治疗药物的研制——盐酸美其嗪对FGFR3抑制作用的考察

• 批准号: 21H03063
• 负责人: 鬼頭 浩史
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: Aichi Children’s Health and Medical Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H03063/
• 关键词: 軟骨無形成症; FGFR3; 塩酸メクリジン; モデルマウス; ゼブラフィッシュモデル

FGFR3シグナル経路におけるメクリジンの作用機序に関する研究では、Rat chondrosarcoma cellを用いたGene set enrichment analysis（GSEA）を実施したところ、メクリジンはMAPK pathwayのうちERKとp38を抑制したがJNKには影響しなかった。したがってメクリジンの作用機序としては、MAP3K以上のレベルであることが推察された。次いで、Cell freeキナーゼアッセイ（MAP3K cascade assay）を実施したところ、メクリジンはMAP3K3 pathwayのリン酸化を抑制していた。分子ターゲットを考えたドラッグデザインを検討するため、MAP3K3とメクリジンのドッキングシミュレーションを行い、3つのドッキングサイト（ATP-site、Allosteric Pocket D、Allosteric Pocket I）の候補を明らかにした。ACHモデルマウスを用いたin vivoにおけるメクリジンの作用に関する研究では、16週齢のACHマウスに骨延長を行い新生骨の形成を検討したところ、ACHマウスでは骨形成が抑制された（以前実施した4週齢での実験とは逆の結果）。同マウスから取り出した骨髄間質細胞のin vitroにおける石灰化を検討したところ、メクリジンは骨髄間質細胞の石灰化を促進したため、骨粗鬆症に対する薬剤の有効性が示唆された。メクリジン2mg/kg/dayを7日齢から56日例まで長期投与したところ、第7頸椎の脊柱管容積の拡大とともに生存率が有意に上昇したため、メクリジンの長期投与は脊柱管狭窄症をレスキューする可能性が示唆された。ゼブラフィッシュモデルにおけるメクリジンの作用に関する研究では、ゼブラフィッシュ幼生にFGF2を投与すると骨形成が促進され、メクリジンはこのFGF2の作用を打ち消した。

在一项关于meclizine对FGFR3信号通路作用机制的研究中，利用大鼠软骨肉瘤细胞进行了基因集富集分析（GSEA），发现meclizine抑制了MAPK通路中的ERK和p38，但对MAPK通路中的ERK和p38没有影响。 JNK 塔。因此，推测meclizine的作用机制处于高于MAP3K的水平。接下来，当进行无细胞激酶测定（MAP3K 级联测定）时，氯苯甲嗪抑制了 MAP3K3 通路的磷酸化。为了研究考虑分子靶标的药物设计，我们对 MAP3K3 和氯苯甲嗪进行了对接模拟，并确定了三个候选对接位点（ATP 位点、变构口袋 D 和变构口袋 I）。在一项使用 ACH 模型小鼠研究氯苯甲嗪体内作用的研究中，对 16 周龄的 ACH 小鼠进行了骨延长，以检查新骨的形成（结果与 1 周龄时的实验相反）。当在体外检查取自同一小鼠的骨髓基质细胞的钙化时，氯苯甲嗪促进了骨髓基质细胞的钙化，表明该药物治疗骨质疏松症的有效性。从7日龄至56日龄长期服用氯苯甲嗪2 mg/kg/天，可显着提高存活率，同时第7颈椎椎管容积扩大，表明长期服用氯苯甲嗪可挽救仔猪的生命。提出了椎管狭窄的可能性。在一项关于 meclizine 在斑马鱼模型中的作用的研究中，向斑马鱼幼虫施用 FGF2 促进了骨形成，而 meclizine 抵消了 FGF2 的这种作用。

项目成果

Docking phenomenon and subsequent acetabular development after gradual reduction using overhead traction for developmental dysplasia of the hip over six months of age.

• DOI: 10.1302/1863-2548.15.210143
• 发表时间: 2021-12-01
• 期刊: Journal of children's orthopaedics
• 作者: Kaneko H;Kitoh H;Kitamura A;Sawamura K;Hattori T
• 通讯作者: Hattori T

Gain-of-Function of FGFR3 Accelerates Bone Repair Following Ischemic Osteonecrosis in Juvenile Mice

FGFR3 的功能获得加速幼年小鼠缺血性骨坏死后的骨修复

• DOI: 10.1007/s00223-022-01019-2
• 发表时间: 2022
• 期刊: Calcified Tissue International
• 影响因子: 4.2
• 作者: Kato Daisaku;Matsushita Masaki;Takegami Yasuhiko;Mishima Kenichi;Kamiya Nobuhiro;Osawa Yusuke;Imagama Shiro;Kitoh Hiroshi
• 通讯作者: Kitoh Hiroshi

軟骨無形成症患児を対象としたFGFR3シグナルを抑制する内服薬の14日間投与治験

抑制软骨发育不全儿童 FGFR3 信号的口服药物的 14 天给药试验

• 发表时间: 2022
• 作者: 松下雅樹;鬼頭浩史;三島健一;神谷庸成;澤村健太;今釜史郎
• 通讯作者: 今釜史郎

骨系統疾患マニュアル

骨系统疾病手册

• 发表时间: 2022
• 作者: Katoh Y;Iriyama T;Kotajima-Murakami H;Sayama S;Ichinose M;Inaoka N;Seyama T;Sato A;Hagino Y;Toshimitsu M;Kumasawa K;Nagamatsu T;Osuga Y;Ikeda K;鬼頭浩史
• 通讯作者: 鬼頭浩史

日常診療で注意すべき骨系統疾患

日常就医应注意的骨系统疾病

• 发表时间: 2022
• 作者: Fujita M;Ochiai Y;Hagino Y;Kobayashi K;Pavey G;Dean B;Ikeda K;宮本健史;鬼頭浩史
• 通讯作者: 鬼頭浩史