トリプレットリピート病のリピート長変動機構解明とリピート短縮治療の基盤確立

阐明三联体重复病的重复长度变异机制并为重复缩短治疗奠定基础

• 批准号: 21H02839
• 负责人: 中森 雅之
• 金额: $ 10.82万
• 依托单位: Yamaguchi University (2023)Osaka University (2021-2022)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02839/
• 关键词: 筋強直性ジストロフィー; ハンチントン病; トリプレットリピート; リピート不安定性; 核酸標的低分子; 脊髄小脳失調症

トリプレットリピート病は、３塩基繰り返し配列（リピート）の異常伸長が原因となる疾患の総称で、ハンチントン病など多くの神経難病が含まれる。これら疾患では、伸長したリピートが長いほど重症となるほか、リピート長は一定ではなく、変動することが知られている。トリプレットリピート病のリピート長変動には、伸長リピートが形成するslipped strand構造に対するDNA修復エラーが関与すると考えられているが、詳細なメカニズムは長らく解明されていない。これまでの検討により申請者は、核酸標的低分子ナフチリジンアザキノロン（NA）がCAGリピートによるslipped strand構造に結合して、ポリメラーゼδ(polδ)複合体によるリピート伸長を抑制し、さらにDNA修復蛋白によるslipped strand DNA切断を調整してリピートが短縮する可能性を見出した。今年度は、疾患の重症度に影響する一塩基多型（SNP）をもつDNA修復蛋白を精製した。それぞれのリコンビナント蛋白をもちいて、ゲルシフトアッセイ(EMSA)によりslipped strand DNAへの結合性を、in vitro repair assayによりslipped strand構造修復機能を解析した。この結果、DNA修復蛋白の標的DNA結合性、slipped strand構造修復に影響を及ぼすSNPを特定した。トリプレットリピート病では、同一患者でも組織によってリピートの長さが異なるほか、リピート伸長のしやすさも組織ごとに大きく変わる。今年度は患者由来骨格筋および脳組織でのトランスクリプトーム解析により、リピート長変動に影響するDNA修復遺伝子の同定も行った。

三胞胎重复疾病是由三个基准重复序列异常伸长引起的疾病的一般术语（重复），其中包括许多棘手的神经系统疾病，例如亨廷顿氏病。在这些疾病中，伸长重复的时间越长，疾病就越严重，并且重复长度是纯洁和波动的。尽管据信，三重态重复​​疾病的重复长度变化涉及由伸长重复序列形成的滑动链结构中的DNA修复误差，但很长一段时间以来尚未阐明详细的机制。基于先前的研究，申请人发现了小核酸靶标氮喹啉（Na）与CAG重复序列引起的滑动链结构，从而通过dna裂解通过DNA修复蛋白来抑制重复蛋白，从而抑制cag重复的延伸，从而抑制了重复的蛋白质，从而抑制了链的延伸。今年，我们用单核苷酸多态性（SNP）纯化了DNA修复蛋白，该蛋白会影响疾病的严重程度。使用每种重组蛋白，通过凝胶移位测定法（EMSA）分析与滑链DNA的结合，并通过体外修复测定法分析了滑动链结构修复功能。结果，鉴定了影响DNA修复蛋白的靶DNA结合特性的SNP和滑链的结构修复。在三胞胎重复疾病中，即使在同一患者中，重复的长度也取决于组织的不同，而重复延伸的易于范围因组织而异。今年，我们还确定了通过转录组分析在患者衍生的骨骼肌和脑组织中影响重复长度变化的DNA修复基因。

项目成果

筋強直性ジストロフィーの中枢神経病態

强直性肌营养不良的中枢神经系统病理学

• 发表时间: 2021
• 作者: Yuki Ito;Shuko Takeda;Tsuneo Nakajima;Akane Oyama;Hikari Takeshita;Kunihiro Miki;Yoichi Takami;Yasushi Takeya;Hiromi Rakugi;Ryuichi Morishita.;仁井見 英樹;稲城玲子;高阪真路;中森雅之
• 通讯作者: 中森雅之

神経疾患研究の現状の課題と展望（2）筋疾患

神经系统疾病研究现状及展望（二）肌肉疾病

• 发表时间: 2021
• 期刊: Clinical Neuroscience
• 作者: 青木吉嗣;中森雅之
• 通讯作者: 中森雅之

筋強直性ジストロフィーの治療開発―基礎研究から臨床試験へ

强直性肌营养不良的治疗开发 - 从基础研究到临床试验

• 发表时间: 2021
• 作者: Ishigaki;S.;Sobue;G.;中森雅之
• 通讯作者: 中森雅之

筋ジストロフィー基盤整備「治験」～筋強直性ジストロフィー患者に対するMYD-0124治験～

肌营养不良基础设施开发“临床试验” - MYD-0124针对强直性肌营养不良患者的临床试验 -

• 发表时间: 2021
• 作者: 伊藤 祐規;武田 朱公;中嶋 恒男;大山 茜;鷹見 洋一;竹屋 泰;樂木 宏実;森下 竜一;Shinji Kohsaka;中森雅之
• 通讯作者: 中森雅之

筋強直性ジストロフィーの病態解明と治療開発

强直性肌营养不良发病机制的阐明和治疗进展

• 发表时间: 2021
• 作者: 伊藤 祐規;武田 朱公;中嶋 恒男;大山 茜;竹下 ひかり;三木 国煕;鷹見 洋一;竹屋 泰;樂木 宏実;森下 竜一;中森雅之
• 通讯作者: 中森雅之