Rimklbの精子形成における役割の解明

阐明 Rimklb 在精子发生中的作用

基本信息

批准号：
20K09633
负责人：
鷹野正興
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Kobe Gakuin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

Rimklb遺伝子をKOしたマウスを作成を行い、得られたマウスはRimklb1アミノ酸欠損型マウス、A29欠損、L30V変異マウスであった。本マウスは雄性不妊の表現型を示しており、精巣の萎縮、精子数、精子運動能が大きく低下していた。また、wildマウスと交配させると、プラグは確認できたものの産仔は全く得られなかった。精細管に空胞が多く見られ、血液－精巣関門形成に関わるp-S6タンパク質が増加していることが分かった。現在Rimklbが精子形成にどのように働いているかについて検討を行っている。1.性ホルモン産生に関わる酵素、また性ホルモン量については、血中テストステロン、精巣テストステロン量には差がなく、性ホルモン産生には影響しない可能性が高い。2.精子形成においては、DNAを巻き付けているヒストンがプロタミンに置き換わる過程が必須で、その過程においてトランジションタンパクTP2というタンパク質が一過性で発現している。しかし、Rimklb遺伝子変異マウスにおいては精巣でこのTP2が残存していた。このことは、精子形成においてRimklbがTP2を制御している可能性を示すものである。3.Rimklbはβ-CGというクエン酸とグルタミン酸が結合した分子を産生する酵素であるが、精巣内におけるβ-CGをLC-MSによって定量する系を検討しており、現在までにβ-CG標準試料をLC-MSによって測定できている。これらの結果はRimklbが精子形成においてDNAを巻き付けているヒストンからプロタミンに置き換わる過程に関与していることを示している。

我们创建了 Rimklb 基因 KO 的小鼠，得到的小鼠是 Rimklb1 氨基酸缺陷小鼠、A29 缺陷小鼠和 L30V 突变小鼠。该小鼠表现出男性不育表型，睾丸萎缩，精子数量和精子活力显着降低。此外，当与野生小鼠交配时，虽然观察到了插头，但根本没有产生后代。结果发现，在生精小管中观察到许多空泡，并且参与血睾屏障形成的p-S6蛋白增加。我们目前正在研究 Rimklb 在精子发生中的作用。 1.关于性激素产生所涉及的酶和性激素的量，血液或睾丸中睾酮的量没有差异，很可能不会影响性激素的产生。 2. 在精子发生过程中，包裹DNA的组蛋白被鱼精蛋白取代的过程是必不可少的，在此过程中，一种称为过渡蛋白TP2的蛋白质被瞬时表达。然而，在 Rimklb 基因突变小鼠中，TP2 仍保留在睾丸中。这表明 Rimklb 在精子发生中控制 TP2 的可能性。 3.Rimklb 是一种产生 β-CG 的酶，β-CG 是柠檬酸和谷氨酸结合的分子。标准样品可以通过 LC-MS 进行测量。这些结果表明，Rimklb 参与了精子发生过程中用鱼精蛋白取代 DNA 包裹组蛋白的过程。