The role of IgD antibody-producing cells in the generation of allergen-specific IgE in type I allergy

IgD 抗体生成细胞在 I 型过敏中过敏原特异性 IgE 生成中的作用

基本信息

批准号：
20K07537
负责人：
藤堂景史
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Tokiwa University (2022)Shiga University of Medical Science (2020-2021)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07537/
关键词：
IgD IgE I型アレルギー抗体 B細胞

项目摘要

当研究は、I型アレルギーの原因となるアレルゲン特異的IgE抗体の産生メカニズムを明らかにするために、IgE抗体と相関的に発現が誘導されるアレルゲン特異的IgD抗体の動態に着目し、アレルゲン特異的IgD抗体の分子特性やこのIgD抗体のIgE抗体産生への関与を明らかにすることを目的としている。IgD分子の存在は古くから知られているにも関わらず、抗体としてのIgDの生理的役割はほとんど明らかでない。そこで本年度は、IgD抗体の分子特性および生理的機能を明らかにするために、昨年度と同様にマウスIgD抗体のリコンビナント体を作成しその解析を行った。マウスIgD抗体のリコンビナント体は、IgD抗体の主な産生部位である頚部リンパ節よりマウスIgD抗体定常部領域遺伝子をクローニングし、そこに4-hydroxy-3-nitrophenylacetyl (NP)に対する特異性を有する抗体可変部領域遺伝子を連結し、さらに抗体軽鎖(λ1軽鎖)遺伝子をp2Aペプチドを介して連結して作成された坑NP-IgD発現ベクターをA20マウスB細胞株に遺伝子導入し、その培養液中からアフィティーカラムを用いることで作成された。今年度は生体で産生されるIgD抗体の生理的機能を調べるため、作成した抗NP-IgD抗体のリコンビナント体をIgDの産生部位であるマウス鼻腔へ投与し、それと同時にこれらのリコンビナント抗体の特異的抗原であるNP-OVAを投与したところ、興味深いことにこのマウスでは、IgEと同じTh2型の免疫応答の際に産生されるIgG1クラスの抗体の産生が誘導され、この抗体産生は鼻腔の所属リンパ節ではない脾臓において誘導されていることから、鼻免疫組織で産生されるIgD抗体は、脾臓などへの抗原の輸送に関与し、Th2型の免疫応答に関与していることが示唆された。

为了阐明引起I型过敏的过敏原特异性IgE抗体的产生机制，本研究重点关注过敏原特异性IgD抗体的动态，其表达与IgE抗体相关。特定 IgD 抗体的分子特征以及这些 IgD 抗体参与 IgE 抗体生产。尽管人们很早就知道 IgD 分子的存在，但 IgD 作为抗体的生理作用却很大程度上未知。因此，今年，为了阐明IgD抗体的分子特征和生理功能，我们与去年一样，创建并分析了重组小鼠IgD抗体。重组小鼠IgD抗体是通过从IgD抗体的主要产生位点颈部淋巴结克隆小鼠IgD抗体恒定区基因，然后将4-羟基-3-硝基苯乙酰基注射到小鼠IgD抗体恒定区基因中来产生的。将(NP)特异性的抗体可变区基因与p2A肽进一步连接抗体轻链(λ1轻链)基因而制作的抗NP-IgD表达载体应用于A20小鼠B细胞。通过将基因引入菌株并使用培养液中的亲和柱。今年，为了研究活体中产生的 IgD 抗体的生理功能，我们将制作的重组抗 NP-IgD 抗体注入小鼠鼻腔（IgD 的产生部位），并在同时研究这些重组抗体的特异性，有趣的是，当给这些小鼠施用抗原 NP-OVA 时，IgE 发生变化。 IgG1 类抗体的产生，与 Th2 型免疫反应相同，IgD 抗体参与将抗原转运至脾脏和其他区域，并参与 Th2 型免疫反应。