致死性不整脈の病的意義不明遺伝子変異に対する、iPS細胞を用いた機能解析系の構築

利用iPS细胞构建致命性心律失常中未知病理意义基因突变的功能分析系统

• 批准号: 20K17147
• 负责人: 吉永 大介
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K17147/
• 关键词: 致死的遺伝性不整脈; 病的意義不明遺伝子変異; iPS細胞; 機能解析

本研究の目的は、致死的遺伝性不整脈の個別改良の実現を目指し、ヒトiPS細胞由来心筋細胞を利用したQT延長症候群やカテコラミン誘発性多形性心室頻拍の迅速かつ効率的な機能解析系を構築することを目的としている。従来の方法では不可能であった、致死的不整脈疾患で検出された病的意義不明遺伝子の機能解析をiPS細胞由来心筋を用いて実現できることを明らかにするため、下記の通りの研究計画を予定していた。令和２年度に、解析対象とする病的意義不明遺伝子変異を抽出し、リコンビナーゼ媒介カセット交換法を用いることで迅速かつ効率的に遺伝子変異をiPS細胞に導入するためのプラットフォームを構築する。その上で、目的とする遺伝子変異を有するiPS細胞株を作成することを計画した。また、令和３年度には、遺伝子変異を有するiPS細胞由来の分化心筋を利用した表現型解析系の構築を実現することを計画していた。しかしながら、本研究については研究代表者が令和２年度８月より米国ボストン小児病院へ留学することとなったため本研究を一旦中断させていただき、帰国後に本研究を再開、継続する予定としている。令和２年度８月時点で、前述のリコンビナーゼ媒介カセット交換法を利用して遺伝子変異を導入するために必要な遺伝子配列を有するiPS細胞を入手し培養保存まで実施した。帰国後に研究を再開できるようになった場合、このiPS細胞に遺伝子変異を導入し、機能解析系構築を遂行していく予定としている。

本研究的目的是利用人iPS细胞来源的心肌细胞开发一种针对长QT综合征和儿茶酚胺诱导的多形性室性心动过速的快速有效的功能分析系统，旨在实现致命性遗传性心律失常的个体化改善。建造。以下研究计划旨在证明可以使用 iPS 细胞来源的心肌对致命性心律失常疾病中检测到的未知病理意义的基因进行功能分析，这是使用传统方法无法实现的。 2020财年，我们将提取未知病理意义的基因突变进行分析，并建立一个平台，利用重组酶介导的盒交换方法快速有效地将基因突变导入iPS细胞。基于此，他们计划创建具有所需基因突变的 iPS 细胞系。此外，我们计划在2021财年使用源自具有基因突变的iPS细胞的分化心肌构建表型分析系统。不过，由于主要研究者将从2020年8月起在美国波士顿儿童医院留学，因此这项研究将暂时停止，我们计划在返回日本后恢复并继续这项研究。截至2020年8月，我们使用上述重组酶介导的盒交换方法获得了具有引入基因突变所需的基因序列的iPS细胞，并将其培养和保存。当他回到日本后能够继续研究时，他计划将基因突变引入这些iPS细胞中并构建功能分析系统。