Elucidation of the mechanism of metabolic reprogramming regulated by EpCAM

阐明EpCAM调节的代谢重编程机制

基本信息

批准号：
20K16340
负责人：
吉田剛
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Juntendo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

EpCAM (epithelial cell adhesion molecule)は大腸癌・肝細胞癌・前立腺癌をはじめとする上皮系腫瘍の癌幹細胞で高度に発現している分子である。これまでの研究によって、EpCAMの細胞内ドメイン（EpICD）がγセクレターゼによって切断されてFHL2およびβカテニンと協約することでWntシグナルを活性化するばかりか、MYCやSOX2などのステムニスに関連する遺伝子の発現を制御することが明らかにされている。本研究で申請者は、EpCAMの発現によってどのように癌幹細胞が生存・増殖に不利な過酷な微小環境に適応しているのかを検証することとした。以前の研究で血清飢餓の状態に暴露された際に、EpCAM陽性の癌細胞はEpCAM陰性の細胞集団と比較してmTORシグナルが有意に活性化されることを見出していた。今回、フローサイトメトリーを用いて癌細胞株をEpCAM高発現と低発現の細胞集団に分離したのちに、xCT（SLC7A11）・LAT1（SLC7A5）・ASCT2（SLC1A5）などのアミノ酸トランスポーターの発現の違いを定量的PCRにて検討したところ、LAT1に有意な差が認められた。LAT1はロイシンを細胞内に取り込みmTORシグナルを活性化することが知られている。LAT1発現の差異に関する本所見は、以前の研究でEpCAMの発現レベルが高いほどmTORシグナルが活性化されやすいことを裏付ける結果であった。さらに申請者はEpICDがLAT1の発現を転写レベルで活性化することを証明した。EpICDを誘導するγセクレターゼおよびADAM17に対する阻害剤を用いてEpCAMの切断を抑制したところ、LAT1の発現レベルは顕著に低下した。

EPCAM（上皮细胞粘附分子）是上皮肿瘤的癌干细胞中高度表达的分子，包括结肠，肝细胞癌和前列腺癌。先前的研究表明，EPCAM的细胞内结构域（EPICD）不仅通过γ分泌裂解并与FHL2和β-catenin合作激活Wnt信号，而且还调节了Stemnis相关基因（如Myc和Sox2）的表达。在这项研究中，申请人决定检查EPCAM表达如何允许癌症干细胞适应对生存和增殖不利的严峻微环境。先前的研究发现，与EPCAM阴性细胞种群相比，在MTOR信号中暴露于血清饥饿时，EPCAM阳性癌细胞被显着激活。在使用流式细胞术将癌细胞系分离为高表达EPCAM细胞群中后，使用定量PCR检查了氨基酸转运蛋白（SLC7A11），LAT1（SLC7A5）和ASCT2（SLC7A5）和ASCT2（SLC7A5）和ASCT2（SLC7A5）的表达差异，并使用定量PCR进行了研究，并在LAT1中发现了显着差异。已知LAT1细胞内掺入亮氨酸并激活MTOR信号。这一关于先前研究支持的LAT1表达差异的发现，即EPCAM表达较高，更有可能激活MTOR信号。此外，申请人表明EPICD在转录水平上激活LAT1表达。当使用γ-分泌酶和ADAM17的抑制剂抑制EPCAM裂解时，LAT1表达水平显着降低。

项目成果

期刊论文数量（7）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

The therapeutic strategy of drug re-positioning to induce autophagic cell death in brain malignancy

DOI：
10.1007/s10495-020-01617-1
发表时间：
2020-06
期刊：
Apoptosis
影响因子：
7.2
作者：
G. J. Yoshida
通讯作者：
G. J. Yoshida

Comment on "GRP94 promotes brain metastasis by engaging pro-survival autophagy".

DOI：
10.1093/neuonc/noaa017
发表时间：
2020-03
期刊：
Neuro-oncology
影响因子：
15.9
作者：
G. J. Yoshida
通讯作者：
G. J. Yoshida

メラノーマの発生と進展の分子細胞生物学

黑色素瘤发生和进展的分子细胞生物学

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
癌と化学療法
影响因子：
0
作者：
Younosuke Sato ; Isamu Okamoto ; Hiroki Kameyama ; Shinji Kudoh ; Haruki Saito ; Mune Sanada ; Noritaka Kudo ; Joeji Wakimoto ; Kosuke Fujino ; Yuki Ikematsu ; Kentaro Tanaka ; Ayako Nishikawa ; Ryo Sakaguchi ; Takaaki Ito;吉田剛
通讯作者：
吉田剛

Regulation of heterogeneous cancer-associated fibroblasts: the molecular pathology of activated signaling pathways