Development of neuroprotective therapy targeting retinal glial cells

针对视网膜神经胶质细胞的神经保护疗法的开发

基本信息

批准号：
21K09736
负责人：
檜森紀子
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

8週齢の野生型マウスとNrf2ノックアウト（KO）マウスにロテノン（30mg/kg）または0.5 % carboxymethyl cellulose（コントロール）を30日間経口投与し、酸化ストレスマーカー8-OHdGを使用した免疫染色、網膜神経節細胞（RGC）数計測、網膜RT-PCR、グリア細胞の免疫染色を施行した。生後5-8日の野生型及びNrf2 KOマウスからミュラー細胞を調製しロテノン（3-100 μM）投与下の細胞生存率と活性酸素分子種（ROS）量をalamarBlue assay、CellROX Green染色で調べた。ロテノン30 µM下の神経栄養因子の遺伝子発現を時間毎にリアルタイムPCRで検討した。野生型・Nrf2KOマウスともロテノン投与群ではコントロールと比べ8-OHdG陽性細胞数の増加を認めたが（P=0.02, P=0.02）、RGC数では有意差を認めなかった。RT-PCRではロテノンを投与したNrf2 KOマウス群において、野生型と比較してGFAP、vimentinの発現上昇を認め（P=0.02, P < 0.01）、免疫染色ではGFAPのシグナル増強を認めた。野生型と比較しNrf2 KOマウスのミュラー細胞の生存率はロテノン存在下で有意に低く（P < 0.05）、ロテノン30、100 µM下のミュラー細胞内ROSは有意に増加した（P < 0.05)。また、ロテノン投与6、24時間後のNrf2 KOマウスのミュラー細胞において神経栄養因子（BDNF、bFGF）の有意な発現上昇を認めた (P < 0.05)。以上よりロテノン存在下、Nrf2 KOマウスのミュラー細胞では神経栄養因子の発現が増強され、神経保護に寄与することが示唆された。

给8周龄野生型小鼠和Nrf2敲除（KO）小鼠口服鱼藤酮（30 mg/kg）或0.5%羧甲基纤维素（对照）30天，并使用氧化应激标记物8-OHdG和8-OHdG进行免疫染色。进行视网膜神经结细胞（RGC）计数、视网膜RT-PCR和神经胶质细胞免疫染色。出生后5-8天从野生型和Nrf2 KO小鼠制备Müller细胞，并使用alamarBlue测定和CellROX Green染色检查鱼藤酮（3-100μM）给药下的细胞活力和活性氧（ROS）量。通过实时PCR检测30μM鱼藤酮下神经营养因子的基因表达。在野生型和 Nrf2KO 小鼠中，与对照组相比，鱼藤酮治疗组的 8-OHdG 阳性细胞数量有所增加（P=0.02，P=0.02），但在鱼藤酮治疗组中没有观察到显着差异。 RGC 的数量。 RT-PCR显示，与野生型相比，鱼藤酮施用的Nrf2 KO小鼠组中GFAP和波形蛋白的表达增加（P = 0.02，P < 0.01），免疫染色显示GFAP信号增强。与野生型小鼠相比，在鱼藤酮存在下，Nrf2 KO小鼠的Müller细胞存活率显着降低（P < 0.05），并且在鱼藤酮30和100 µM存在下，Müller细胞中的ROS显着增加（P < 0.05）。 0.05）。此外，在鱼藤酮给药后6小时和24小时，Nrf2 KO小鼠的Muller细胞中神经营养因子（BDNF、bFGF）的表达显着增加（P < 0.05）。这些结果表明，在鱼藤酮存在的情况下，Nrf2 KO 小鼠的 Müller 细胞中神经营养因子的表达增强，有助于神经保护。

项目成果

期刊论文数量（11）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

全身循環系における細胞間ネットワーク

全身循环系统中的细胞间网络

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
檜森紀子
通讯作者：
檜森紀子

Five-year visual outcomes after optic neuritis in anti-MOG antibody-associated disease.

抗 MOG 抗体相关疾病中视神经炎后的五年视力结果。

DOI：
10.1016/j.msard.2021.103222
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Akaishi T; Himori N; Takeshita T; Misu T; Takahashi T; Takai Y; Nishiyama S; Fujimori J; Ishii T; Aoki M; Fujihara K; Nakazawa T; Nakashima I.
通讯作者：
Nakashima I.

Regulatory mechanisms of retinal ganglion cell death in normal tension glaucoma and potential therapies