頭頸部扁平上皮癌オルガノイドの接触型共培養による転移リンパ節被膜外浸潤の機序解明

头颈鳞状细胞癌类器官接触共培养阐明转移淋巴结包膜外侵袭机制

• 批准号: 21K09636
• 负责人: 西村 剛志
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09636/
• 关键词: 頭頸部扁平上皮癌; 頸部リンパ節転移; リンパ節被膜外浸潤; 癌オルガノイド; 遺伝子解析; 3次元接触共培養; 頭頸部癌; 被膜外浸潤; 接触共培養

頭頸部癌治療において頸部リンパ節の根治制御は予後に関連し、転移リンパ節の病理学的評価で被膜外浸潤を認める場合は再発リスクが高いとされる。申請者の教室では頭頸部癌患者検体を用いた3次元癌オルガノイド培養技術を確立した。癌オルガノイドはin vitroで立体的に培養され、既成の共培養チャンバーで接触培養が可能であることに着目した。リンパ節被膜を構成する組織は強固な膠原繊維が主であり、平滑筋と血管が混在する。リンパ節内に転移した癌細胞が被膜をどのように浸潤していくのか、構成組織の中でどの部分が浸潤を受けやすいか、などが接触培養下で解明される可能性があると考えた。そこで頸部リンパ節転移を有する頭頸部扁平上皮癌患者の手術検体から癌オルガノイドを作成し、リンパ節被膜外浸潤のin vitroでの再現、その機序に関する遺伝子変異の解析、さらに関連性が示唆された遺伝子発現を調節することでリンパ節被膜外浸潤に及ぼす影響を確認することで、生体内で転移リンパ節の被膜外浸潤が生じる機序を明らかにすること、予後規定因子としての妥当性を評価することを目的とした。2年次研究計画として、標準治療として手術が選択される、①原発が口腔、中咽頭、下咽頭、喉頭、②頸部リンパ節転移陽性、③組織学的に扁平上皮癌、と診断された患者の手術検体より原発巣、転移リンパ節、正常粘膜の一部を実験検体として採取し癌オルガノイドの作製と遺伝子解析を行う方針であった。癌オルガノイドの作製におけるトラブルシューティングを行っている。

在头颈癌的治疗中，颈部淋巴结的根治控制与预后相关，如果转移淋巴结的病理评估发现被膜外侵犯，则复发的风险很高。申请人的课堂已经建立了利用头颈癌患者标本的三维癌症类器官培养技术。我们关注的是癌症类器官可以在体外进行三维培养，并且可以在现成的共培养室中进行接触培养。构成淋巴结被膜的组织主要由强韧的胶原纤维组成，并混合有平滑肌和血管。我们相信接触培养也许能够阐明转移到淋巴结的癌细胞如何浸润被膜，以及组成组织的哪些部分容易受到侵袭。因此，我们从颈淋巴结转移的头颈部鳞状细胞癌患者的手术标本中创建了癌症类器官，在体外再现了淋巴结包膜外浸润，分析了与其机制相关的基因突变，并进一步阐明了两者之间的关系。目的是通过确认调节基因表达对淋巴结被膜外侵袭的影响来评估转移性淋巴结被膜外侵袭在体内发生的机制及其作为预后因素的有效性。作为第二年研究计划的一部分，选择手术作为标准治疗；（1）原发肿瘤位于口腔、口咽部、下咽部或喉部；（2）颈部淋巴结转移阳性；组织学诊断为鳞状细胞癌，计划从患者的手术标本中采集原发肿瘤、转移淋巴结和部分正常粘膜作为实验标本，用于制作癌症类器官和进行基因分析。我们正在解决癌症类器官生产的问题。

项目成果

Validation of the risk factors for primary control of early T-stage laryngeal, oropharyngeal, and hypopharyngeal squamous cell carcinoma by transoral surgery: a prospective observational study

通过经口手术初步控制早期 T 期喉、口咽和下咽鳞状细胞癌的危险因素的验证：一项前瞻性观察性研究

• DOI: 10.1007/s10147-021-01992-y
• 发表时间: 2021
• 影响因子: 3.3
• 作者: Nishimura Goshi;Sano Daisuke;Arai Yasuhiro;Takahashi Hideaki;Hatano Takashi;Kitani Yosuke;Takada Kentaro;Wada Takashi;Hiiragi Yohei;Oridate Nobuhiko
• 通讯作者: Oridate Nobuhiko

A risk factor for newly diagnosed secondary cancer in patients with early-stage laryngeal, oropharyngeal, or hypopharyngeal cancer: sub-analysis of a prospective observation study

早期喉癌、口咽癌或下咽癌患者新诊断继发性癌症的危险因素：前瞻性观察研究的亚组分析

• DOI: 10.1007/s10147-021-02080-x
• 发表时间: 2021
• 影响因子: 3.3
• 作者: Nishimura Goshi;Sano Daisuke;Arai Yasuhiro;Takahashi Hideaki;Hatano Takashi;Kitani Yosuke;Takada Kentaro;Wada Takashi;Hiiragi Yohei;Oridate Nobuhiko
• 通讯作者: Oridate Nobuhiko

Validation of the risk factors for primary control of early T-stage laryngeal, oropharyngeal, and hypopharyngeal squamous cell carcinoma by transoral surgery: a prospective observational study

通过经口手术初步控制早期 T 期喉、口咽和下咽鳞状细胞癌的危险因素的验证：一项前瞻性观察性研究

• DOI: 10.1007/s10147-021-01992-y
• 发表时间: 2021
• 影响因子: 3.3
• 作者: Nishimura Goshi;Sano Daisuke;Arai Yasuhiro;Takahashi Hideaki;Hatano Takashi;Kitani Yosuke;Takada Kentaro;Wada Takashi;Hiiragi Yohei;Oridate Nobuhiko
• 通讯作者: Oridate Nobuhiko

A risk factor for newly diagnosed secondary cancer in patients with early-stage laryngeal, oropharyngeal, or hypopharyngeal cancer: sub-analysis of a prospective observation study

早期喉癌、口咽癌或下咽癌患者新诊断继发性癌症的危险因素：前瞻性观察研究的亚组分析

• DOI: 10.1007/s10147-021-02080-x
• 发表时间: 2021
• 影响因子: 3.3
• 作者: Nishimura Goshi;Sano Daisuke;Arai Yasuhiro;Takahashi Hideaki;Hatano Takashi;Kitani Yosuke;Takada Kentaro;Wada Takashi;Hiiragi Yohei;Oridate Nobuhiko
• 通讯作者: Oridate Nobuhiko