細菌由来の分子による腸ー肺連関メカニズムに基づいたARDS治療薬開発の基盤研究

使用细菌衍生分子基于肠-肺耦合机制开发 ARDS 疗法的基础研究

• 批准号: 21K09038
• 负责人: 高氏 修平
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09038/
• 关键词: プロバイオティクス; 腸ー肺連関; ARDS; 腸内細菌叢; 腸－肺連関

本研究では１．細菌由来の分泌物からARDSモデルにおける肺の炎症を改善する菌由来分子を同定すること.２．菌由来分子による腸および肺内細菌叢の変化を明らか にすること.3．菌由来分子により誘導される腸管上皮あるいはリンパ球・単球由来の分子の中からARDSを改善させる作用を仲介する分子を同定すること，これら を通して腸ー肺連関のメカニズムを明らかにすることを目指している.本年度は，前年に引き続いて細菌由来の分泌物から肺の炎症抑制分子の探索を目標として下記の通り実験を進めた.本年度よりヒト腸管上皮細胞(HCEC-1CT)，ヒト微小肺内上皮細胞(Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cell, HPMEC)の共培養系を使用した．各種プロバイオティクスの培養上清を上記細胞に投与した後に，lipopolysaccharide(LPS)で活性化させ，24時 間後に上記細胞からRNAを抽出，その後，RT-PCRにより各種炎症性サイトカイン(IL-1β，TNF-α，IL-6)の発現量変化を観察した.しかしながら，HPMECのLPS刺激前後でサイトカインの有意な変化は認めなかった．今後はLPSの種類などを変えて，同様の実験を行いヒト細胞での実験系の確立を目指す．最終的に肺の炎症を抑制する作用を有するプロバイオティクス上清について種々のカラムを用いて分離していく．

在本研究中，1.从细菌分泌物中鉴定出改善 ARDS 模型肺部炎症的细菌衍生分子。 2．阐明细菌衍生分子引起的肠道和肺部菌群的变化。3．今年，我们的目标是确定介导细菌来源的分子或淋巴细胞和单核细胞来源的分子诱导的肠上皮细胞中ARDS改善效果的分子，并通过这些分子阐明肠-肺关系的机制。从去年开始，我们进行了以下实验，目的是从细菌分泌物中寻找肺部炎症抑制分子。从今年开始，我们开始使用人肠上皮细胞（HCEC-1CT）上皮细胞（Human Pulmonary微血管使用内皮细胞共培养系统（HPMEC）。将各种益生菌的培养上清液给予上述细胞后，用脂多糖（LPS）活化，24小时后从细胞中提取RNA，然后通过RT-PCR检测各种炎症细胞因子（IL-1β）。在用 LPS 刺激 HPMEC 之前和之后，没有观察到细胞因子的显着变化。未来，我们将通过改变LPS的类型进行类似的实验，旨在建立利用人体细胞的实验系统。最后，使用各种柱分离具有抑制肺部炎症作用的益生菌上清液。