脳死関連肺障害の病態解明と予防・治療法の開発ーNPY,VEGFと腸換気法の検討

阐明脑死亡相关肺部疾病的病理学并制定预防和治疗方法——NPY、VEGF和肠道通气方法的检查

基本信息

批准号：
22K09045
负责人：
西脇公俊
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

我々は、神経原性肺水腫の発生において、肺交感神経終末にカテコールアミンと共存する神経ペプチドY（NPY）による神経性調節が細胞透過性に関与すること、および肺（気管支粘膜、平滑筋、肺胞毛細血管内皮細胞）における血管内皮細胞増殖因子（vascular endothelial growth factor: VEGF）の発現が肺血管透過性亢進に深く関与していることを明らかにしてきた。本研究の目的は、in vitro肺細胞透過性評価系とげっ歯類を用いたin vivo脳死誘発肺水腫モデル系を確立し、NPYやVEGFの作用機序を明らかにすることである。また、脳死患者の肺障害の予防・治療法の一つとして、「腸換気法」による肺保護効果についても検討する。本年度は、ラットから単離した肺胞上皮細胞を使用するin vitro肺細胞透過性評価系とin vivo脳死誘発肺水腫モデルの構築及び「腸換気法」の有用性の検討を試みた。In vitro肺細胞透過性評価系には、ラットから単離した2型肺胞上皮細胞を1型肺胞上皮細胞に分化した初代細胞を用いることにした。しかしながら、2型肺胞上皮細胞の選択的回収がうまくできなかった。そのため、単離後の細胞分化、使用する培地、最適な細胞播種密度、細胞培養期間などについても検討できなかった。In vivo脳死誘発肺水腫モデルは、ラット頭蓋内にバルーンカテーテルを挿入し、バルーン内に生理食塩水を注入することにより頭蓋内圧を上昇させ、脳幹部にヘルニアを起こすことにより作製した。同モデルからの気管支肺胞洗浄液（Bronchoalveolar lavage fluid: BALF）採取法を確立し、サンプル中の総蛋白を含む生化学的検査法を検討中である。

我们发现神经肽 Y (NPY) 与肺交感神经末梢共存的儿茶酚胺的神经源性调节参与神经源性肺水肿发展中的细胞通透性。毛细血管内皮细胞与肺血管通透性过高密切相关。本研究的目的是建立体外肺细胞通透性评估系统和啮齿动物体内脑死亡诱导的肺水肿模型系统，并阐明NPY和VEGF的作用机制。我们还将研究肠道通气对肺部的保护作用，作为脑死亡患者肺损伤的预防和治疗方法之一。今年，我们尝试利用从大鼠身上分离的肺泡上皮细胞构建体外肺细胞通透性评估系统，建立体内脑死亡诱发的肺水肿模型，并检验“肠通气法”的实用性。对于体外肺细胞通透性评估系统，我们决定使用通过将大鼠分离的2型肺泡上皮细胞分化为1型肺泡上皮细胞而获得的原代细胞。然而，2型肺泡上皮细胞的选择性恢复并不成功。因此，无法检查分离后的细胞分化情况、所用培养基、最佳细胞接种密度、细胞培养周期等。通过将球囊导管插入大鼠颅骨，向球囊内注入生理盐水以增加颅内压，引起脑干疝出，建立体内脑死亡肺水肿模型。我们已经建立了一种从该模型中收集支气管肺泡灌洗液（BALF）的方法，目前正在考虑一种包括样品中总蛋白的生化测试方法。

项目成果

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专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Enteral liquid ventilation oxygenates a hypoxic pig model

肠内液体通气为缺氧猪模型充氧

DOI：
10.1016/j.isci.2023.106142
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
5.8
作者：
Tasuku Fujii;Yosuke Yoneyama;Akiko Kinebuchi;Hiroshi Date;Kimitoshi Nishiwaki;Takanori Takebe
通讯作者：
Takanori Takebe