非ベンゾジアゼピン系睡眠薬を標的とした抗体ファージライブラリーの構築と検出法開発

非苯二氮类安眠药抗体噬菌体库构建及检测方法开发

• 批准号: 20K10557
• 负责人: 笹尾 亜子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K10557/
• 关键词: 免疫学的検出; 薬毒物スクリーニング; 非ベンゾジアゼピン系睡眠薬; 抗体ファージライブラリー; 向精神薬; 法医中毒学; 組換え抗体; 免疫学的検出法; 薬物スクリーニング; 非ベンゾジアゼピン系

法医解剖や検屍・検案時の死因診断において、その死因に薬物が関与したかを確認する事は極めて重要である。現在、その検査手段として免疫学的検出法を用いた簡易薬物検査キットが幅広く利用されている。免疫学的検出法は、簡便に対象薬物を検出できるため急を要する現場では最適なスクリーニング法である。これまで我々は、新規薬物に対する免疫学的簡易検出法を組換え抗体技術を利用して提供する体制作りを行ってきた。特に、抗体検索に有用な抗体ファージライブラリーの構築は、迅速な薬物検出法の構築に大いに貢献できると考えている。そこで我々は、近年処方が拡大している非ベンゾジアゼピン系睡眠薬を標的とした抗体ファージライブラリーの構築とその検出法の開発を本研究課題の目的とした。本年度は、非ベンゾジアゼピン系睡眠薬ザレプロンに対する組換え抗体の作製を実施した。まず、昨年度までに調製した抗ザレプロン抗体遺伝子についてその抗体遺伝子配列の特定を行った。（進捗1：抗ザレプロン抗体遺伝子のシークエンス解析）。次に特定した抗体遺伝子を検出系として用いる予定のQuenchbody（Q-body）発現遺伝子に挿入した。（進捗2：Q-body発現遺伝子の構築）。今後は、この組換え抗体のザレプロンやその代謝物との結合能を検討していく予定である。

在法医尸检或尸检中诊断死因时，确认死因是否与药物有关极为重要。目前，广泛采用采用免疫学检测方法的简易药物检测试剂盒作为检测手段。免疫检测方法可以很容易地检测到目标药物，因此是紧急情况下最合适的筛选方法。到目前为止，我们一直在构建一个系统，利用重组抗体技术为新药提供简单的免疫学检测方法。特别是，我们相信构建可用于抗体搜索的抗体噬菌体文库可以极大地促进快速药物检测方法的构建。因此，本研究项目的目的是构建针对近年来越来越多处方的非苯二氮卓类安眠药的抗体噬菌体库，并开发检测方法。今年，我们生产了一种针对非苯二氮卓类安眠药扎来普隆的重组抗体。首先，鉴定了截至去年制备的抗扎来普隆抗体基因的抗体基因序列。 （进展一：抗扎来普隆抗体基因序列分析）。接下来，将鉴定出的抗体基因插入到Quenchbody（Q-body）表达基因中，计划将其用作检测系统。 （进展二：Q-body表达基因的构建）。未来，我们计划研究该重组抗体与扎来普隆及其代谢物的结合能力。

项目成果

薬物に対する抗体検索を目的とした抗体ファージライブラリーの構築

构建抗体噬菌体库以寻找药物抗体

• 发表时间: 2022
• 作者: 笹尾亜子;深水雄貴;平田香子;堤博志;古川翔太;大津由紀;西谷陽子
• 通讯作者: 西谷陽子