Development of human gingival organoid systems and investigation for the induction mechanisms of gingival inflammation and autoimmune diseases.

人类牙龈类器官系统的开发及牙龈炎症和自身免疫性疾病诱导机制的研究。

基本信息

批准号：
20K09913
负责人：
津田啓方
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は初代ヒト歯肉上皮細胞を用いた三次元培養系を作成し、その固有層に毛細血管および白血球等の存在する、より生体に近い三次元歯肉組織の作製することが第一の目的である。また、二次元培養系では歯肉上皮細胞に短鎖脂肪酸が作用すると細胞死が起こるが、その細胞死が起こるメカニズムを本研究で作成した三次元培養系とで比較することが第二の目的である。初代ヒト歯肉上皮細胞の単離培養が難しく、本年度は研究に時間をじっくり取りにくい状況でもあったことから、ヒト歯肉上皮細胞株の二次元培養系を用いて、短鎖脂肪酸によるヒト歯肉上皮細胞死誘導メカニズムを探ることとした。短鎖脂肪酸である酪酸およびプロピオン酸はヒト歯肉上皮の細胞死を引き起こすが、酪酸だけでなくプロピオン酸においてもHDAC阻害作用を持つことがわかった。次に、同じくHDAC阻害因子であるSAHAやValproic acidを作用させると、酪酸やプロピオン酸を作用させたときと同様に細胞死を引き起こすことが解った。ヒストンはヒストンアセチルトランスフェラーゼ（HAT）によってアセチル化され、HDACにより脱アセチル化されることから、ヒト歯肉上皮細胞をHATの阻害作用を持つC646で前処理することで、HATによるアセチル化作用を減弱させ、短鎖脂肪酸を作用させると、ヒストンのアセチル化は減弱し、それに伴い短鎖脂肪酸誘導細胞死も減弱した。短鎖脂肪酸の代わりにSAHAやValproic acidを作用させると、ヒストンH3のアセチル化を減弱させ、それに伴う細胞死も減弱させた。これらの事から、短鎖脂肪酸のHDAC阻害作用がヒト歯肉上皮細胞の細胞死誘導に関与していることが解った。

这项研究的主要目的是使用原代人牙龈上皮细胞创建一个三维培养系统，并创建三维牙龈组织，该组织更接近生物体，在层中具有毛细血管和白细胞。此外，在二维培养系统中，当短链脂肪酸作用于牙龈上皮细胞时，会发生细胞死亡，第二个目的是比较本研究中创建的三维培养系统的细胞死亡的机制。由于很难分离和培养原发性人牙龈上皮细胞，今年很难花一些时间进行研究，因此我们决定使用人类牙龈上皮细胞系的二维培养系统来探索短链脂肪酸，从而探索人类Gingival上皮细胞死亡的机制。短链脂肪酸丁酸和丙酸引起人牙龈上皮的细胞死亡，但发现它们不仅在丁酸酸中，而且对丙酸具有HDAC抑制作用。接下来，发现当使用HDAC抑制剂的Saha和丙戊酸时，使用与使用丁酸或丙酸时相同的方式导致细胞死亡。组蛋白是通过组蛋白乙酰基转移酶（HAT）和HDAC脱乙酰基的，因此用C646预处理人牙龈上皮细胞，该细胞具有HAT的抑制作用，减轻了由HAT和HAT引起的乙酰化效应，以及当乙酸脂肪含量的短疗法和乙烯基化的乙烯酯量，并属于乙烯酸盐的效果，并遵守了乙酸的固定型。酸诱导的细胞死亡。当使用SAHA或丙戊酸代替短链脂肪酸时，减少了组蛋白H3的乙酰化，并且所得的细胞死亡也减少了。这些发现表明，短链脂肪酸的HDAC抑制作用与诱导人牙龈上皮细胞的细胞死亡有关。

项目成果

期刊论文数量（9）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Histone-deacetylase-inhibitory effects of periodontopathic-bacterial metabolites induce human gingival epithelial Ca9-22 cell death

DOI：
10.1007/s10266-022-00775-9
发表时间：
2022-12
期刊：
Odontology
影响因子：
2.5
作者：
Kazuki Uemichi;Yoshikazu Mikami;Takayasu Watanabe;K. Shinozuka;M. Tonogi;Hiromasa Tsuda
通讯作者：
Kazuki Uemichi;Yoshikazu Mikami;Takayasu Watanabe;K. Shinozuka;M. Tonogi;Hiromasa Tsuda

Presynaptic NK1 Receptor Activation by Substance P Suppresses EPSCs via Nitric Oxide Synthesis in the Rat Insular Cortex

DOI：
10.1016/j.neuroscience.2020.12.012
发表时间：
2020-12
期刊：
Neuroscience
影响因子：
3.3
作者：
Sachie Matsumura;Kiyofumi Yamamoto;Y. Nakaya;Kazunori O’Hashi;K. Kaneko;H. Takei;Hiromasa Tsuda;T. Shirakawa;Masayuki Kobayashi
通讯作者：
Sachie Matsumura;Kiyofumi Yamamoto;Y. Nakaya;Kazunori O’Hashi;K. Kaneko;H. Takei;Hiromasa Tsuda;T. Shirakawa;Masayuki Kobayashi

口腔内細菌代謝産物が破骨細胞分化に及ぼす影響

口腔细菌代谢产物对破骨细胞分化的影响

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
浦木隆太;今井優樹;伊藤睦美;河岡義裕;山崎小百合;朝山雄之，津田啓方，生木俊輔，鈴木直人，米原啓之
通讯作者：
朝山雄之，津田啓方，生木俊輔，鈴木直人，米原啓之

歯周組織で誘導される細胞死が歯周疾患および全身疾患に及ぼしうる影響

牙周组织诱导的细胞死亡对牙周和全身疾病的可能影响

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Odanaka M;Shime H;Tsuiji M;Matoba T;Imai M;Yasumizu Y;Uraki R;Minohara K;Watanabe M;Bonito AJ;Fukuyama H;Ohkura N;Sakaguchi S;Morita A;Yamazaki S;津田啓方
通讯作者：
津田啓方

Bioinformatics analysis of dysregulated exosomal microRNAs derived from oral squamous cell carcinoma cells