Development of a method for enhancing the antitumor effect and reducing the side effects in therapy for Bladder cancer with Mycobacterium Bovis (BCG) by Macrophage adsorbent

开发一种通过巨噬细胞吸附剂增强牛分枝杆菌（BCG）治疗膀胱癌的抗肿瘤效果并减少副作用的方法

• 批准号: 20K09551
• 负责人: 能見 勇人
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K09551/
• 关键词: BCG; M1; 腫瘍関連; BCG療法; 尿路上皮癌; 膀胱注入療法; 牛結核菌; マウス; BCGマクロファージ; M1マクロファージ; 腫瘍関連マクロファージ; 膀胱癌; 再発予防; マクロファージ吸着; 腫瘍免疫

膀胱癌に対して実臨床で行われるBCG（牛結核菌）の膀胱注入療法は、再発予防療法では最も有効な治療法であり、また膀胱癌の免疫賦活療法として最も安価な方法であり広く使用されている。しかし、頻尿、排尿時痛、発熱などの副作用が多い点が問題であり、また投与回数も6-8週にわたり毎週1回投与を繰り返すという継続した労力を要するものである。BCGが膀胱癌細胞に直接はたらき細胞障害効果を発揮するのなどの報告も含め、複数の報告がなされるもののBCGの作用機序は未だに明確にはなっていない。我々は、BALB/cマウスの腹腔に移植した腫瘍細胞のMeth A細胞とP815細胞の増殖において、BCGによる免疫賦活が抗腫瘍効果をいかに発現するのか検証している。BALB/cマウスの腹腔内に、BCGとMeth Aを単純同時投与したモデルと、これにBCGをマウス腹腔に先行投与をしたモデル（感作モデル）を比較ところ、感作モデルの方がBCGの抗腫瘍効果が強いが、免疫賦活は1weeks前に単回行うことでも十分な効果があることを確認した。本実験もモデルがBCG療法と近い機序による免疫賦活を行っていることを少なくとも否定しないが、BCG感作回数に関してマウス腹腔と人間の膀胱では単純に相関はしない点は考慮を要するが、基礎的には重要なデータと考え、解析をすすめる方針としている。マウス肥満細胞腫であるP185でも同様に経過を確認している。BCG感作BALB/cマウスの腹腔内にMeth A腫瘍細胞とBCGと同時に移植したモデルの腹腔内に分泌されるINFγについてELAISA法で調査し、IFNγは腫瘍投与後日数を経て上昇することを確認した。FACSを用いた調査からもMφを含む免疫賦活がBCG療法作用機序が中心と考えている。確認のため、BCGが腫瘍に直接作用するか否かもin vitroで並行して検証する予定である。

膀胱癌临床实践中使用的卡介苗（牛结核分枝杆菌）膀胱注射疗法是预防复发最有效的治疗方法，也是目前最便宜且广泛使用的膀胱癌免疫刺激疗法。但问题是它有很多副作用，如尿频、排尿时疼痛、发烧等，并且需要持续努力每周给药一次，持续6至8周。尽管已有多项报道，其中一项报道显示卡介苗直接作用于膀胱癌细胞并发挥细胞毒作用，但卡介苗的作用机制仍不清楚。我们正在研究 BCG 介导的免疫刺激如何对移植到 BALB/c 小鼠腹腔内的 Meth A 细胞和 P815 肿瘤细胞的增殖发挥抗肿瘤作用。当比较将 BCG 和 Meth A 简单地同时施用到 BALB/c 小鼠腹膜腔中的模型和先前将 BCG 施用到小鼠腹腔中的模型（致敏模型）时，致敏模型显示，BCG 虽然抗肿瘤效果强，已确认即使1周前进行一次免疫刺激也能充分发挥效果。该实验并不否认该模型通过类似于卡介苗治疗的机制来激活免疫，但必须考虑到小鼠腹膜腔和人类膀胱之间关于卡介苗致敏的数量不存在简单的相关性。公司认为这是重要数据并计划进行分析。小鼠肥大细胞肿瘤 P185 也证实了类似的进展。我们使用 ELAISA 方法研究了将 Meth A 肿瘤细胞和 BCG 同时植入腹腔的 BCG 致敏 BALB/c 小鼠腹腔内分泌的 INFγ，并证实在肿瘤给药后几天内 IFNγ 增加。 做过。使用FACS的研究还表明，包括Mφ在内的免疫激活是BCG治疗的主要作用机制。为了证实，我们计划同时在体外测试卡介苗是否对肿瘤有直接作用。

项目成果

マウスのMeth A繊維肉腫細胞に対するBCG療法の効果と機序の検証

卡介苗治疗小鼠Meth A纤维肉瘤细胞的作用及机制验证

• 发表时间: 2021
• 作者: 能見勇人;藤原裕也;加納陽祐;松永知久;前之園良一;吉川勇希;西村一希;内本泰三;上原博史;小村和正;稲元輝生;東 治人
• 通讯作者: 東 治人

マウスのMeth A繊維肉腫細胞に対するBCG療法の効果の検証とその機序の解明について

卡介苗治疗小鼠Meth A纤维肉瘤细胞的效果验证及机制阐明

• 发表时间: 2021
• 作者: 能見勇人;松永知久;前之園良一;堤 岳之;市橋 淳;吉川勇希;谷口俊理;上原博史;小村和正;伊夫貴直和;稲元輝生;東 治人.
• 通讯作者: 東 治人.

腫瘍関連細胞の吸着による抗腫瘍効果の検討

通过吸附肿瘤相关细胞来检验抗肿瘤效果

• 发表时间: 2020
• 作者: 能見勇人;松永 知久;前之園 良一;堤 岳之;平野 一 ;藤原 裕也 ;市橋 淳 ;吉川 勇希;谷口 俊理 ;小村 和正;上原 博史;伊夫貴 直和 ; 稲元 輝生; 東 治人
• 通讯作者: 東 治人