Pathological involvement of endothelial alpha synuclein in age-related insulin resistance

内皮α突触核蛋白在年龄相关胰岛素抵抗中的病理学参与

• 批准号: 21K07389
• 负责人: 鷹見 洋一
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07389/
• 关键词: αシヌクレイン; 血管内皮; 老化; インスリン抵抗性; 骨格筋

(1)当初予定していた血管内皮特異的ノックアウトマウスの樹立が出来なかったため、赤血球特異的SNCAノックアウトマウス（SNCA FL/FL:HBB-Cre+; RBC-SNCA KO）を作成することとした。循環血液中のSNCA、つまり、糖代謝に関わる可能性のある機能性液性因子としてのSNCAを規定する組織は血管内皮以外に赤血球を想定している。理由としては以下の結果による。①赤血球には豊富にSNCAが存在し、ヒトの血液検体での解析にて赤血球数やヘモグロビン、ヘマトクリットとSNCA濃度とは有意な相関を認めた。②WTの骨髄をSNCA KOに移植すると血中SNCAが上昇し、逆にSNCA KOの骨髄をWTに移植すると血中濃度が減少した。③脳にもSNCAが多く発現するが、脳特異的にSNCAを過剰発現したSNCA KOでは血中SNCAは増加しなかった。現在、RBC-SNCA KOの交配による作成は最終段階にあり、作成でき次第、表現型の解析を行う予定である。(2)血管内皮におけるSNCAの局在と血管内皮機能について検討している。血管内皮細胞の免疫染色にてSNCAは核及び細胞質ともに存在していることが分かり、血管内皮細胞の種類（ヒト臍帯静脈内皮細胞、ヒト大動脈内皮細胞、ヒト脳微小血管内皮）によってもその局在が異なる可能性があった。細胞質に過剰発現するSNCA-NESベクター、核に過剰発現するSNCA-NLSベクターを作成し、それぞれに発現するSNCAの血管内皮機能を検討する予定である。また、SNCAの局在に関与する因子（各種液性因子、細胞老化など）も検討している。更に、SNCAの血管内皮細胞での局在と糖代謝機能との関連を検討予定としている。

(1)由于我们无法按照原计划建立血管内皮特异性基因敲除小鼠，因此我们决定建立红细胞特异性SNCA基因敲除小鼠（SNCA FL/FL:HBB-Cre+；RBC-SNCA KO）。除血管内皮外，循环血液中调节SNCA的组织，即SNCA作为可能参与糖代谢的功能性体液因子，被认为是红细胞。其原因在于以下结果。 ① SNCA大量存在于红细胞中，对人体血液样本的分析显示，红细胞计数、血红蛋白、血细胞比容和SNCA浓度之间存在显着相关性。 (2)当WT骨髓移植到SNCA KO时，血中SNCA浓度升高，反之，当SNCA KO骨髓移植到WT时，血浓度下降。 ③尽管SNCA在大脑中也高表达，但在SNCA KO中，血液中的SNCA并没有增加，SNCA KO在大脑中特异地过度表达SNCA。目前，通过杂交培育RBC-SNCA KO已进入最后阶段，我们计划在培育完成后立即进行表型分析。 (2)我们正在研究SNCA在血管内皮中的定位及其功能。血管内皮细胞的免疫染色显示，SNCA同时存在于细胞核和细胞质中，其定位因血管内皮细胞的类型而异（人脐静脉内皮细胞、人主动脉内皮细胞、人脑微血管内皮细胞）。不同的。我们计划创建在细胞质中过表达的SNCA-NES载体和在细胞核中过表达的SNCA-NLS载体，并检查各自表达的SNCA的血管内皮功能。我们还在研究与 SNCA 定位有关的因素（例如各种体液因素和细胞衰老）。此外，我们计划研究SNCA在血管内皮细胞中的定位与葡萄糖代谢功能之间的关系。

项目成果

Novel pathophysiological roles of α‐synuclein in age‐related vascular endothelial dysfunction

α突触核蛋白在年龄相关血管内皮功能障碍中的新病理生理学作用

• DOI: 10.1096/fj.202101621r
• 发表时间: 2022-09-20
• 期刊: The FASEB Journal
• 作者: Y. Takami;Cheng Wang;H. Nakagami;Koichi Yamamoto;Yoichi Nozato;Yuki Imaizumi;Motonori Nagasawa;H. Takeshita;T. Nakajima;S. Takeda;Y. Takeya;Y. Kaneda;H. Rakugi
• 通讯作者: H. Rakugi

Novel pathophysiological roles of α‐synuclein in age‐related vascular endothelial dysfunction

α-突触核蛋白在年龄相关血管内皮功能障碍中的新病理生理学作用

• DOI: 10.1096/fj.202101621r
• 发表时间: 2022
• 作者: Takami Yoichi;Wang Cheng;Nakagami Hironori;Yamamoto Koichi;Nozato Yoichi;Imaizumi Yuki;Nagasawa Motonori;Takeshita Hikari;Nakajima Tsuneo;Takeda Shuko;Takeya Yasushi;Kaneda Yasufumi;Rakugi Hiromi
• 通讯作者: Rakugi Hiromi