腎糸球体上皮細胞スリット膜におけるNeurexinの役割の解明

阐明 Neurexin 在肾小球上皮细胞裂隙膜中的作用

基本信息

批准号：
20K08587
负责人：
福住好恭
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K08587/
关键词：
ポドサイトスリット膜 neurexin CD2AP Podocin Nephrin ネフローゼ症候群蛋白尿 Par6 synaptotagmin SV2B nephrin Neurexin

项目摘要

以前の検討でNeurexin1αは細胞外部ドメインに選択的スプライシング部位を持ち、ポドサイトで発現しているNeurexin 1αはスプライシングサイト（SS）4+の分子型であることを示した。令和4年度は、Neurexin1αとスリット膜主要分子CD2AP、Podocinとの結合様式をHEK293細胞発現系で解析した。その結果、CD2AP、PodocinはSS4+のみと結合し、神経細胞に多いSS4-とは結合しない事を明らかにした。一方で、Par6、CASKはSS4の有無に関わらず、Neurexin1αと結合することを明らかにした。次に、Neurexin１αのCD2AP、Podocinとの結合部位の解析を行い、2分子ともにNeurexin1αの細胞内部の前半部で結合することを明らかにした。以上の結果から、Neurexin1αの細胞外部のSS4はCD2AP、Podocinと細胞内部で結合するのに重要であることを示した。ネフローゼ症候群におけるNeurexin1の発現を検討するため、ヒトの巣状分節性糸球体硬化症のモデルであるアドリアマイシン（ADR）腎症におけるNeurexin1の免疫染色を行った。二重染色による解析で、正常糸球体で観察されたNeurexin1とCD2APの共局在が、蛋白尿がまだ出現していない病態誘導後24時間で減少し、7日目ではNeurexin1とCD2APの染色がほとんど消失していることを明らかにした。以上の結果から、Neurexin1とCD2APの乖離が蛋白尿の発症に関与していると考えた。発達期糸球体を用いた発現解析で、Neurexin1がスリット膜形成に関与することを示した。

此前的研究表明，Neurexin 1α在胞外结构域具有选择性剪接位点，足细胞中表达的Neurexin 1α是剪接位点（SS）4+分子类型。 2020财年，我们利用HEK293细胞表达系统分析了Neurexin1α与狭缝膜主要分子CD2AP和Podocin之间的结合模式。结果显示，CD2AP 和 Podocin 仅与 SS4+ 结合，但不与神经元中丰富的 SS4- 结合。另一方面，我们发现，无论 SS4 是否存在，Par6 和 CASK 都会与 Neurexin1α 结合。接下来，我们分析了Neurexin1α与CD2AP和Podocin的结合位点，发现这两个分子结合在细胞内Neurexin1α的前半部分。上述结果表明，Neurexin1α胞外侧的SS4对于与细胞内的CD2AP和Podocin结合具有重要作用。为了检查 Neurexin1 在肾病综合征中的表达，我们对阿霉素 (ADR) 肾病（人类局灶节段性肾小球硬化模型）中的 Neurexin1 进行了免疫染色。双重染色分析表明，在正常肾小球中观察到的Neurexin1和CD2AP的共定位在病理诱导后24小时，此时蛋白尿尚未出现，并且在第7天，Neurexin1和CD2AP的共定位已经降低。几乎消失了。基于上述结果，我们认为Neurexin1和CD2AP之间的解离参与了蛋白尿的发生。使用发育中的肾小球进行表达分析表明 Neurexin1 参与缝隙膜的形成。

项目成果

期刊论文数量（23）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Ephrin-B1はPar-6-Cdc42結合を阻害しtight junction形成の抑制、スリット膜の維持に働く

Ephrin-B1 抑制 Par-6-Cdc42 结合，抑制紧密连接形成，并维持裂隙膜。

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
福住好恭;張瑩;安田英紀;河内裕
通讯作者：
河内裕

Ephrin-B1はPar-6-Cdc42結合を阻害しTJ形成の抑制、スリット膜維持に働く

Ephrin-B1 抑制 Par-6-Cdc42 结合、抑制 TJ 形成并维持裂隙膜。

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
福住好恭;安田英紀;張瑩;河内裕
通讯作者：
河内裕

Tacrolimus ameliorates podocyte injury by restoring FK506 binding protein 12 (FKBP12) at actin cytoskeleton

DOI：
10.1096/fj.202101052r
发表时间：
2021-11-01
期刊：
FASEB JOURNAL
影响因子：
4.8
作者：
Yasuda，Hidenori;Fukusumi，Yoshiyasu;Kawachi，Hiroshi
通讯作者：
Kawachi，Hiroshi

Synbindin Downregulation Participates in Slit Diaphragm Dysfunction

DOI：
10.1159/000517975
发表时间：
2021-08
期刊：
American Journal of Nephrology
影响因子：
4.2
作者：
Veniamin Ivanov;Y. Fukusumi;Ying Zhang;H. Yasuda;Meiko Kitazawa;H. Kawachi
通讯作者：
Veniamin Ivanov;Y. Fukusumi;Ying Zhang;H. Yasuda;Meiko Kitazawa;H. Kawachi

タクロリムスはアクチン細胞骨格のFKBP12を保持する事でポドサイト傷害を軽減する

他克莫司通过保留肌动蛋白细胞骨架中的 FKBP12 来减少足细胞损伤。