ストレス応答転写制御に果たす小Maf群因子の機能とがん悪性化との関連性

Maf小群因子在应激反应转录控制中的功能与癌症恶性肿瘤的关系

基本信息

批准号：
20K07335
负责人：
勝岡史城
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07335/
关键词：
Nrf2 小Maf 転写制御 Maf ストレス応答

项目摘要

塩基性領域-ロイシンジッパー(bZIP)型転写因子であるCNC群因子と小Maf群因子(sMaf)のヘテロ二量体は、様々な生体防御遺伝子群の発現を制御する。ヒトを含む脊椎動物では、3種類のsMaf群因子(MafF, MafG, MafK)が同定されているが、各因子の機能の違いは充分解析されていない。本研究では、3種類のsMaf群因子の機能的な差異を明らかにすることを目的として開始した。手法としては、Nrf2とsMaf因子をリンカーペプチドで融合させたテザード分子を構築し、これをsMaf群因子の三重欠失細胞に導入することで、導入したテザード二量体分子の機能を特異的に評価する手法 (Tethered Dimer Rescue)TDR系を用いて解析を実施している。昨年度までに、テザード二量体発現プロモーターの変更と安定細胞株のクローン化による解析条件の最適化を行い、テザード二量体の機能を定量的に評価出来る環境を整えることができた。この結果、今年度、純粋にテザードNrf2-MafG二量体(T-N2G)の量に依存して、Nrf2の標的遺伝子群が多段階に活性化される事を明らかにする事ができた。また、T-N2Gの核内局在について解析を行い、別のCNC因子であるp45とは異なり、核マトリックス濃縮分画とは異なる核可用性分画に多く存在する事を明らかにした。また、この核内局在に対してMafGのC末端は、大きく影響を与えないことも確認した。RNAシークエンスの結果、MafGのC末端を欠失したテザードNrf2-MafG二量体(T-N2GdC)は、T-N2Gと同等の標的遺伝子転写活性化を示した。よって、3種類のsMaf間で最も多様性に富むC末端領域がNrf2-sMafの転写活性化に必須ではないという知見を得た。

基本区域亮氨酸拉链（BZIP）转录因子CNC组因子和小型MAF组因子（SMAF）的异二聚体调节各种生物防御基因组的表达。在包括人类在内的脊椎动物中，已经确定了三种类型的SMAF组因子（MAFF，MAFG，MAFK），但尚未完全分析每个因素功能的差异。这项研究始于阐明三个SMAF组因子之间的功能差异。该方法是构造通过将NRF2和SMAF因子与接头肽融合获得的束缚分子，然后将其引入SMAF组因子的三偏度细胞中，并专门评估引入的蛋白系二聚体分子的功能（绑扎二聚体救援），TDR系统。到去年，我们已经能够通过更改束缚二聚体表达式启动子和稳定细胞系的克隆来优化分析条件，从而创建一个可以定量评估束缚二聚体功能的环境。结果，可以揭示NRF2基因的目标组今年在多个阶段被激活，具体取决于纯束缚的NRF2-MAFG二聚体（T-N2G）。我们还分析了T-N2G的核定位，表明与P45（另一个CNC因子）不同，它存在于核可用性分数中，与富含核基质的分数不同。我们还确认，MAFG的C末端对这种核定位没有重大影响。 RNA测序表明，与MAFG的C末端系在一起的NRF2-MAFG二聚体（T-N2GDC）显示出与T-N2G相似的靶基因转录激活。因此，我们获得了这样的发现，即在三种类型的SMAF中最多样化的C末端区域对于NRF2-SMAF的转录激活不是必不可少的。

项目成果

期刊论文数量（9）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

テザード二量体が明らかにするNrf1-MafGヘテロ二量体のタンパク質恒常性ストレス応答遺伝子の発現制御に対する貢献.

Nrf1-MafG 异二聚体对蛋白质稳态调节和束缚二聚体揭示的应激反应基因表达的贡献。

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
勝岡史城;大槻晃史;畑中望;山本雅之
通讯作者：
山本雅之

Nrf2-MafGヘテロ二量体の転写制御におけるMafG C末端の機能

MafG C 末端在 Nrf2-MafG 异二聚体转录调控中的功能

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
奥山遥奈;畑中望;山本雅之;勝岡史城
通讯作者：
勝岡史城

Identification of Dominant Transcripts in Oxidative Stress Response by a Full-Length Transcriptome Analysis

通过全长转录组分析鉴定氧化应激反应中的主要转录本

DOI：
10.1128/mcb.00472-20
发表时间：
2020
期刊：
Molecular and Cellular Biology
影响因子：
5.3
作者：
Otsuki Akihito;Okamura Yasunobu;Aoki Yuichi;Ishida Noriko;Kumada Kazuki;Minegishi Naoko;Katsuoka Fumiki;Kinoshita Kengo;Yamamoto Masayuki
通讯作者：
Yamamoto Masayuki

Target Gene Diversity of the Nrf1-MafG Transcription Factor Revealed by a Tethered Heterodimer