発達期視床におけるヒゲ経験依存的シナプス再編の神経活動依存性の解析

发育中丘脑胡须经验依赖性突触重组的神经活动依赖性分析

基本信息

批准号：
20K06862
负责人：
河村寿子
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

所属研究室内外の先行論文および未発表データから、PrV2由来の内側毛帯と視床VPmニューロン間のシナプス結合においてマウスの生後12-15日目(P12-P15)がヒゲ抜去に対する臨界期であり、この期間のヒゲ抜去はシナプス強化と刈り込みを障害することが知られていたが、その前後の時期の入力線維PrV2およびシナプス後細胞VPmニューロンの神経活動がPrV2-VPmシナプスの選択的強化と刈り込みに及ぼす作用は不明であった。これまでに、抑制性DREADDs(hM4D(Gi))を発現するAAVを生後0-2日目の新生マウスのPrV2・VPm（シナプス前・後細胞)に発現させ、P8-P11、P12-P15、P16-P19の各期間にCNOを腹腔投与することによって神経活動を時期特異的に抑制し、その後P21以降まで通常飼育したのちに、PrV2-VPmシナプス伝達を電気生理学的に解析した。その結果、P12-P15ではPrV2とVPmいずれの神経活動抑制もシナプス刈り込みを障害したが、P8-P11ではPrV2の活動抑制でのみシナプス刈り込みが障害されるという結果が得られ、PrV2-VPmシナプスの刈り込み過程に、PrV2の活動にのみ依存する時期が存在することが示唆された。しかしながら、P8-P11に行ったVPmの活動抑制の影響が、P21以降のシナプス解析までの期間にマスクされた可能性も考えられたため、P8-P11でのVPm活動抑制直後のP12-P13でシナプス伝達を解析した。その結果、P12-P13においてもシナプス刈り込みが正常であることを確認した。また、発達時期およびPrV2とVPm毎の活動抑制で残存する多重支配シナプスの由来に関する形態学的解析は、DREADDsを発現したPrV2ニューロン由来のシナプス終末を可視化するために新たなAAVを入手して現在も進行中である。

From previous papers and unpublished data from within the laboratory and outside the affiliated laboratory, it was known that on the postnaptic connection between the medial hair band and the thalamic VPm neurons of mice on postnapal extraction at the 12-15th day (P12-P15) of mice was the critical phase for beard extraction, and that beard extraction during this period impairs synaptic strengthening and pruning, but the effect of neural activity在选择性加强和修剪PRV2-VPM突触的选择性增强和修剪的突触后和突触后细胞VPM神经元处的输入纤维PRV2和突触后细胞VPM神经元未知。迄今为止，在出生后0-2天，新生小鼠的PRV2和VPM和VPM（突触前和突触后细胞）中表达表达抑制性恐惧的AAV（HM4D（GI）），并在出生后0-2天表达了神经活动，并以时间特定的方式抑制神经活动，并在p8-p1 p8-p1 p8-p1 p15，p1 p15，p8-p15，以及P12-p1 p15，p1 p15，以及P12-p1 p15，P12-p15，p15，以及持续饲养，直到P21及以后为止，对PRV2-VPM的突触传播进行电生理分析。结果表明，p12-p15中PRV2和VPM的神经活性抑制均受损的突触修剪，而p8-p11抑制只有在抑制PRV2活性时，P8-P11损害了突触修剪，这表明PRV2-VPM突触的修剪过程中有一个唯一取决于PRV2活性的过程。但是，在从P21开始到突触分析的期间，抑制VPM活性对P8-P11的影响也可能被掩盖，因此在抑制P8-P11的VPM活性后，立即在P12-P13中分析了突触传播。结果，可以证实突触修剪在P12-P13中也正常。此外，目前正在进行对每种PRV2和VPM的活性抑制导致的多种主导突触的形态分析，以及目前正在进行的多种主导的突触，并且收购了新的AAV来可视化来自表达恐怖的PRV2神经元的突触终末。