細胞老化抑制による、新しいNASH治療法の開発

通过抑制细胞衰老开发新的 NASH 治疗方法

• 批准号: 21K11689
• 负责人: 加藤 正樹
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Nakamura Gakuen College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K11689/
• 关键词: 非アルコール性脂肪肝炎; 細胞老化; フィトケミカル; 細胞死; 抗線維化; 肝線維化; 脂肪肝; NASH

HepG2細胞を用いた、定量的な細胞老化の系の確立を行った。培養液に過酸化水素（H2O2）250μMあるいはドキソルビシン（DOX）0.5μM を加えて2時間インキュベートした後に、各種フィトケミカルを添加した培地に交換し、６日目に細胞を回収して細胞溶解液を作成してSA β-GALアッセイを行った。スルフォラファン、クルクミン、ケルセチン、フィセチン、ゲニステインについて、非刺激下および、H2O2あるいはDOX刺激下での細胞老化に与える影響を検討した。20μMのスルフォラファンは、無刺激下の細胞老化を約20％抑制し、H2O2刺激下では約28％抑制、DOX刺激下では約15％抑制したが、100μMでは強い細胞障害性を示した。50μMのクルクミンは、無刺激下の細胞老化を約51％抑制し、DOX刺激では約61％抑制したが、H2O2刺激では細胞老化を約75％促進する活性を示した。ケルセチン添加群では、非刺激下で約48%の細胞老化を抑制したが、H2O2刺激下では明らかな抑制効果は認められなかった。フィセチン添加群では、非刺激下で細胞老化を約64%抑制し、またDOX刺激下では約50%抑制し、さらにH2O2刺激下では約44%抑制効果が認められた。ゲニステイン添加群では、DOX刺激下で約24%の抑制効果が認められた。また、HepG2細胞で脂質貯留低減効果が示唆された、スルフォラファン（0.015％、S群）およびクルクミン（0.3％、C群）をNASHモデルマウスに与えその効果を評価した。21週目に肝臓を摘出しmRNA発現を評価したところ、S群ではPPARαやCPT1など脂質酸化系遺伝子発現の増強、C群ではFASやACC１など脂質合成系遺伝子発現の低下が認められ、NASHの進展抑制に効果がある可能性が示唆された。

使用HEPG2细胞建立了定量细胞衰老系统。将过氧化氢（H2O2）添加到培养基中，将阿霉素（DOX）孵育2小时，并将培养基替换为加入各种植物化学物质的培养基。在第6天，收集细胞以制备细胞裂解物，并进行SAβ-GAL测定法。研究了在不刺激下以及H2O2或DOX刺激下的细胞衰老的硫素，姜黄素，槲皮素，菲塞肽和染料木黄酮的影响。 20μM磺烷抑制细胞衰老，而无需刺激约20％，在H2O2刺激下28％，在DOX刺激下15％，但100μM表现出强大的细胞毒性。 50μM姜黄素抑制细胞衰老而不会刺激约51％，而DOX刺激约为61％，而H2O2刺激显示活性促进细胞衰老约75％。在槲皮素添加的组中，在不刺激下抑制了约48％的细胞衰老，但在H2O2刺激下未观察到明显的抑制作用。在Fisetin添加的组中，在不刺激下，细胞衰老被约64％抑制，在DOX刺激下约50％，在H2O2刺激下抑制了约44％。在染料木黄酮添加的组中，在DOX刺激下观察到约24％的抑制作用。此外，建议将Sulforaphane（0.015％，组S）和姜黄素（0.3％，C组）（C组）降低HEPG2细胞中的脂质保留率，并对NASH模型小鼠进行了评估并评估其作用。当在第21周去除肝脏时，评估了mRNA表达，S组显示出脂质氧化基因（如PPARα和CPT1）的表达增强，C组C组显示出脂质合成基因（如Fas和ACC1）表达的降低，这表明它可能有效地抑制了NASH的进展。

项目成果

NASH制御を目的とした、ファイトケミカルによるHepG2細胞の細胞老化抑制の試み

尝试使用植物化学物质抑制 HepG2 细胞的细胞衰老来控制 NASH

• 发表时间: 2023
• 作者: 隈本志帆;末武勲;小野美咲;河手久弥;加藤正樹
• 通讯作者: 加藤正樹

NAFLD・NASHの病態と臨床

NAFLD/NASH 的病理学和临床状况

• 发表时间: 2022
• 作者: 板倉 陽子;佐々木 紀彦;豊田 雅士;石原孝也 前田真希 石原直忠;加藤正樹
• 通讯作者: 加藤正樹

きのこ熱水抽出物のα-シヌクレインのアミロイド形成および分解に対する効果

蘑菇热水提取物对淀粉样蛋白形成和α-突触核蛋白降解的影响

• 发表时间: 2023
• 作者: 小野美咲;宗正智;隈本志帆;沖智之;折田綾音;佐々木裕子;加藤正樹;河手久弥;末武勲
• 通讯作者: 末武勲