細胞老化抑制による、新しいNASH治療法の開発
通过抑制细胞衰老开发新的 NASH 治疗方法
基本信息
- 批准号:21K11689
- 负责人:
- 金额:$ 2.58万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2021
- 资助国家:日本
- 起止时间:2021-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
HepG2細胞を用いた、定量的な細胞老化の系の確立を行った。培養液に過酸化水素(H2O2)250μMあるいはドキソルビシン(DOX)0.5μM を加えて2時間インキュベートした後に、各種フィトケミカルを添加した培地に交換し、6日目に細胞を回収して細胞溶解液を作成してSA β-GALアッセイを行った。スルフォラファン、クルクミン、ケルセチン、フィセチン、ゲニステインについて、非刺激下および、H2O2あるいはDOX刺激下での細胞老化に与える影響を検討した。20μMのスルフォラファンは、無刺激下の細胞老化を約20%抑制し、H2O2刺激下では約28%抑制、DOX刺激下では約15%抑制したが、100μMでは強い細胞障害性を示した。50μMのクルクミンは、無刺激下の細胞老化を約51%抑制し、DOX刺激では約61%抑制したが、H2O2刺激では細胞老化を約75%促進する活性を示した。ケルセチン添加群では、非刺激下で約48%の細胞老化を抑制したが、H2O2刺激下では明らかな抑制効果は認められなかった。フィセチン添加群では、非刺激下で細胞老化を約64%抑制し、またDOX刺激下では約50%抑制し、さらにH2O2刺激下では約44%抑制効果が認められた。ゲニステイン添加群では、DOX刺激下で約24%の抑制効果が認められた。また、HepG2細胞で脂質貯留低減効果が示唆された、スルフォラファン(0.015%、S群)およびクルクミン(0.3%、C群)をNASHモデルマウスに与えその効果を評価した。21週目に肝臓を摘出しmRNA発現を評価したところ、S群ではPPARαやCPT1など脂質酸化系遺伝子発現の増強、C群ではFASやACC1など脂質合成系遺伝子発現の低下が認められ、NASHの進展抑制に効果がある可能性が示唆された。
使用HEPG2细胞建立了定量细胞衰老系统。将过氧化氢(H2O2)添加到培养基中,并将0.5μM的阿霉素(DOX)孵育2小时,然后用含有各种植物化学物质的培养基代替,并在第6天收集细胞以制备细胞裂解物,并进行SAβ-GAL分析。研究了在不刺激下以及H2O2或DOX刺激下的细胞衰老的硫素,姜黄素,槲皮素,菲塞肽和染料木黄酮的影响。 20μM磺烷抑制细胞衰老,而无需刺激约20%,在H2O2刺激下28%,在DOX刺激下15%,但100μM表现出强大的细胞毒性。 50μM姜黄素抑制细胞衰老而不会刺激约51%,而DOX刺激约为61%,而H2O2刺激显示活性促进细胞衰老约75%。在槲皮素添加的组中,在不刺激下抑制了约48%的细胞衰老,但在H2O2刺激下未观察到明显的抑制作用。在Fisetin添加的组中,在不刺激下,细胞衰老被约64%抑制,在DOX刺激下约50%,在H2O2刺激下抑制了约44%。在染料木黄酮添加的组中,在DOX刺激下观察到约24%的抑制作用。此外,建议将Sulforaphane(0.015%,组S)和姜黄素(0.3%,C组)(C组)降低HEPG2细胞中的脂质保留率,并对NASH模型小鼠进行了评估并评估其作用。当在第21周去除肝脏时,评估了mRNA表达,S组显示出脂质氧化基因(如PPARα和CPT1)的表达增强,C组C组显示出脂质合成基因(如Fas和ACC1)表达的降低,这表明它可能有效地抑制了NASH的进展。
项目成果
期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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- DOI:
- 发表时间:2023
- 期刊:
- 影响因子:0
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- 通讯作者:加藤正樹
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- 通讯作者:末武勲
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- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:板倉 陽子;佐々木 紀彦;豊田 雅士;石原孝也 前田真希 石原直忠;加藤正樹
- 通讯作者:加藤正樹
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