Transcriptional disruption in craniofacial neural crest by administration of drugs at the early stage of pregnancy possibly causes the HFM-like craniofacial malformation in rat embryos.

妊娠早期给药导致颅面神经嵴转录破坏，可能导致大鼠胚胎出现 HFM 样颅面畸形。

基本信息

批准号：
21K10261
负责人：
今井元
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Ohu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の作業目標は、『① 頭部神経堤の上皮間葉転換/脱上皮化(EMT)が、どのように阻害されるのか。② 頭部NCCの移動経路が、どのように攪乱されるのか。③脳神経の軸索ガイダンス因子が、どのように攪乱されるのか。④脳神経ニューロンの伸長が、どのように攪乱されるのか。⑤ 上顎・下顎・舌骨・耳小骨などに、どのような奇形を生じるのか。』などである。今年度は、推定受精時刻に個体差が大きかったSDラットから、受精時刻に個体差が殆ど生じないWistar-Imamichi ラットに系統を変え、目的とする発生ステージの胎仔を確実に得られる時刻を確定した。すなわち、同じ繁殖元から購入したWistar-Imamichi ラットにおける妊娠日齢・時刻とsomite（体節）数の関係を明らかにし、これによって、今までのSDラットの実験系では限界があった、胎仔の厳密な発生ステージ特異的なVPA投与の影響を、同じ発生ステージにある胎仔のサンプル数を揃えて解析することが可能になった。既に、上記の『⑤ 上顎・下顎・舌骨・耳小骨などに、どのような奇形を生じるのか。』に対する研究を進めている。すなわち、妊娠8日目のWistar-Imamichiラットの母獣 (胎仔の胎齢8.75：頭部神経堤形成期の直前に相当)を用いて、実験群にはVPA、対照群には生理食塩水を単回投与し、頭部NCCの形成と移動の撹乱を行った胚を妊娠20日目に摘出し、アルシアンブルー-アリザリンレッド染色をした透明化骨格標本を作成し、これらのサンプルの解析を進めている最中である。

本研究的目标是： 1. 如何抑制颅神经嵴的上皮间质转化/去上皮化（EMT）？ ② 头部NCC的移动路径如何受到干扰？ ③ 脑神经的轴突导向因子是如何被破坏的？ ④脑神经元的生长是如何受到干扰的？ ⑤ 上颌、下颌、舌骨、听小骨等有哪些畸形？ “ ETC。今年，我们将预测受精时间个体差异较大的SD大鼠品系改为受精时间几乎没有个体差异的Wistar-Imamichi大鼠，并确定了我们能够可靠获得胎儿的时间达到了预期的发展阶段。换句话说，我们阐明了从同一饲养来源购买的 Wistar-Imamichi 大鼠的孕龄和时间与体节数量之间的关系，这揭示了现有 SD 大鼠实验系统的局限性，现在可以进行分析。使用同一发育阶段的胎儿样本进行 VPA 给药的严格发育阶段特异性效应。上面已经提到了， ⑤ 上颌、下颌、舌骨、听小骨等会出现哪些畸形？研究正在进行中。即，使用怀孕第8天（胎龄8.75，对应于颅神经嵴形成阶段之前）的Wistar-Imamichi大鼠母亲，实验组接受VPA，对照组接受简单的生理盐水胚胎。注射两次，扰乱了头部 NCC 的形成和运动，在妊娠第 20 天将其切除，并制作了用阿尔新蓝和茜素红染色的透明骨骼标本，我目前正在对这些样本进行分析。。